lncRNA-Malat1介导miR-30b/140调节内毛细胞突触蛋白Dynamin的机制研究

Sensorineural hearing loss(SNHL)is one of the most common reason of auditory sense disability.Synapse pathological change of inner hair cells is an important pathological mechanism of it .Studies have shown that Dynamin is the key protein to maintain synaptic vesicle endocytosis but how to regulate is not clear.We found that miRNAs have the function of regulating synaptic protein expression,and previous study results indicated that miRNA30b/140 can regulate the expression of Dynamin protein at the same time both of them have a positive coordination effect.However it is not known how miRNA30b and miRNA140 to communicate with each other.Combined with the previous foundation, we infer that lncRNA-Malat1 may be involved in the interaction between miR-30b and miR-140,it affects the process of vesicles endocytosis of hair cells, as the act of ceRNA of the two miRs participates in the regulation of Dynamin.To verify this ,our project intends to use a variety of means, such as proteomics , electrophysiology, etc .To confirm“lncRNA-Malat1-miR-protein-endocytosis hypothesis”by a physiological and pathological model.Through this study, we hope to improve the physiological mechanism of auditory synaptic transmission.Explain the possible. pathogenesis of Sensorineural hearing loss from the perspective of vesicle endocytosis.

感音神经性聋是最常见的听觉残疾，内耳毛细胞的突触病变是其发生的重要病理机制。研究表明Dynamin蛋白是维持突触囊泡内吞的关键蛋白，但其调控机制并不清楚。我们发现miRNA具有调节突触蛋白表达的功能，前期实验结果提示miRNA30b/140能够同时调控Dynamin蛋白的表达，且两者具有正向协调作用，但miRNA30b和miRNA140之间通过什么方式进行沟通并不清楚。结合前期基础我们推测：多个miRNA可调控Dynamin蛋白，lncRNA-Malat1可能介导miR-30b和miR-140之间的信号沟通，作为两个miR的ceRNA参与Dynamin蛋白的调控。为验证这一假说，本项目拟运用蛋白组学、电生理学等多种手段，通过生理、病理模型来证实“lncRNA-Malat1-miR-蛋白-内吞假说”。通过本研究可望完善听信号突触传递的生理机制，从囊泡内吞回收层面阐释感音神经性聋可能发病原因。

感音神经性聋是最常见的听觉残疾，内耳毛细胞的突触病变是其发生的重要病理机制。研究表明Dynamin等一系列蛋白是维持突触囊泡内吞的关键蛋白，但每一关键蛋白调控机制并不清楚。我们发现miRNA具有调节突触蛋白表达的功能，根据我们前期实验结果提示不同miRNA能够同时调控蛋白的表达，且相互间具有协调作用，但他们之间通过什么方式进行沟通并不清楚。结合前期基础我们推测：多个miRNA可调控Dynamin蛋白，lncRNA可能介导相互间的信号沟通。为验证这一假说，本项目拟运用多种手段，通过生理、病理模型来证实“lncRNA- miR-蛋白-突触调控假说”。通过本研究可望完善听信号突触传递的生理机制，阐释感音神经性聋尤其是老年性聋可能发病原因及其潜在防治策略。.实验成果具体如下：1、我们测量了不同年龄阶段小鼠耳蜗 miR表达量，结果显示，随着年龄的增加耳蜗中miR-30b和miR-140表达水平逐渐增高。2、利用转录组测序技术检测成年组和老年组C57BL/6J小鼠内耳基底膜，筛选差异表达基因（differentially expression genes, DEGs）。功能富集显示，下调基因主要参与电压门控离子通道活性调控和突触调控，上调基因主要参与免疫调控，部分基因可能是导致老年性聋突触改变的重要因素。3、研究表明小鼠耳蜗不同部位内毛细胞具有的不同基因表达谱，发现3个基因（Pvalb、Fbxo32 和 Sncg）在顶回和底回内毛细胞之间存在差异表达。4、建立了老年性耳聋小鼠模型，并对老年性耳聋小鼠耳蜗底回全转录组测序生物信息学分析；结果表明，在C57BL/6j小鼠中，lncRNA和mRNA的差异表达伴随AHL的发生，为筛选老年性耳聋相关的靶基因提供了依据；预测这些差异表达的lncRNA可能通过凋亡途径的mRNAs参与了AHL的发生发展，这些靶基因可能是治疗AHL的潜在靶点。5、利用基金的支持我们同时检测了人工耳蜗植入术后言语康复效果评估及近红外检测，并为预测人工耳蜗植入效果作出了评估。. 在基金支持下发表论文5篇：其中国内核心期刊4篇；SCI收录1篇，IF：3.72。参加学术会议6次；培养硕士研究生4名，在读博士研究生2名。.在本项基金研究中，我们与国内相关实验室密切合作，特此感谢陆军军医大学神经生物学教研室、西南医院中心实验室，感谢辛苦工作的研究生！