中和TGF-beta增强HER-2癌基因靶向治疗效果的机制研究

抗肿瘤免疫细胞可显著促进癌基因靶向治疗的效果，但肿瘤微环境的免疫抑制作用却抑制了抗肿瘤免疫细胞的活化、浸润等。TGF-beta在肿瘤微环境的免疫抑制中起着非常重要的作用。我们研究发现，用特异性抗体中和TGF-beta可显著提高HER-2癌基因靶向治疗的效果；进一步的机制初步研究发现，中和TGF-beta可显著促进NK细胞等抗肿瘤细胞在肿瘤组织中的浸润，而清除NK细胞则可明显削弱TGF-beta中和对HER-2癌基因靶向治疗效果的促进作用，但其作用机制尚不清楚。本研究拟在我们已有研究基础上，以乳腺癌为研究模型，以HER-2为靶基因，深入研究TGF-beta中和与HER-2癌基因靶向治疗相结合的情况下，NK细胞等抗肿瘤免疫细胞在肿瘤组织中的浸润、活性、对肿瘤细胞老化和凋亡等的影响及其分子机制，为免疫细胞促进癌基因靶向治疗效果的机制研究提供实验数据，为肿瘤治疗新方法的建立奠定一定的实验基础。

抗肿瘤免疫细胞可显著促进癌基因靶向治疗的效果，但肿瘤微环境的免疫抑制作用却抑制了抗肿瘤免疫细胞的活化、浸润等。TGF-β在肿瘤微环境的免疫抑制中起着非常重要的作用，抑制TGF-β的生物学活性是否能提高癌基因靶向治疗的效果及其机制尚不清楚。在本项目的研究中，我们发现小鼠黑色素瘤细胞系B16高表达癌基因HER-2，采用RNA干扰的方法抑制B16细胞中HER-2表达后可显著抑制B16细胞的增殖，HER-2表达的抑制促进了B16细胞的凋亡，导致了B16细胞的G2/M期阻滞，且可在一定程度上导致B16细胞的老化。分别用转染了对照载体和HER-2 RNA干扰载体的B16细胞（分别命名为B16C和B16si3）接种小鼠后，接种B16si3细胞的小鼠的肿瘤明显小于接种B16C细胞的小鼠的肿瘤，且接种B16si3细胞的小鼠的存活率明显高于接种了B16C细胞的小鼠，提示B16细胞是在小鼠体内研究内源性HER-2功能及基于HER-2的肿瘤治疗方法的理想模型细胞。基于这一研究模型，我们用特异性抗体中和TGF-β，在一定程度上抑制了B16C细胞在小鼠体内的生长，特别是显著抑制了B16si3细胞在小鼠体内的生长，显著提高了接种B16si3细胞的小鼠的存活率，表明TGF-β中和可显著提高HER-2癌基因靶向治疗的效果。进一步的机制研究发现，中和TGF-β可显著促进CD4+ T细胞、CD8+ T细胞和NK细胞等抗肿瘤免疫细胞在肿瘤组织中的浸润，并促进肿瘤组织中肿瘤细胞的凋亡。体外研究发现，肿瘤浸润CD4+ T细胞、NK细胞等抗肿瘤免疫细胞可通过其所分泌的细胞因子促进B16si3细胞的老化。我们的研究证实，中和TGF-β可通过促进CD4+ T细胞、NK细胞等抗肿瘤免疫细胞的浸润，进而促进肿瘤细胞的凋亡和老化，从而显著增强HER-2癌基因靶向治疗的效果。这一研究成果为肿瘤的治疗提供了新的思路，为抗肿瘤免疫细胞促进癌基因靶向治疗效果的机制研究提供了更多的实验数据。