循环甲基化抑癌基因定量用于NSCLC化疗疗效评估的意义

Chemotherapy is the main treatment of the advanced lung cancer, especially for non-small cell lung cancer(NSCLC), and imaging examination used in the past can not reflect the efficacy timely and sensitively, which lacks laboratory indicators of the efficacy of monitoring and assessment. Multiple factors are involved in the occurrence and development of lung cancer. The major molecular mechanism of lung carcinogenesis is the inactivation of tumor suppressor genes by the hypermethylation in the promoter region, such as RASSF1A and APC with high frequency of methylation, is the key factor leading to its inactivation. Many studies have shown that the methylation rate of RASSF1A or/and APC accounts for more than 90% in lung cancer. The live tumor cells of lung cancer patients die after chemotherapy , and genomic DNA is released from cancer cells and then absorbed into the blood stream. As a result, the level of methylated genes goes up in peripheral blood. The relevance of the quantity of these genes in plasma to chemotherapy efficacy of non-small cell lung cancer patient has not been confirmed. The aim of this study is to identify the relationship between the level of methylated tumor suppressor genes (RASSF1A or/and APC) and chemosensitivity ,and set up noval clinical laboratory tests for the efficacy assessment of chemotherapy in NSCLC.

化疗是中晚期非小细胞肺癌临床治疗的主要手段，以往通过影像学检查不能及时敏感的反映治疗效果。对疗效监测及评估缺少实验指标。肺癌的发生和发展是多因素参与的复杂病理改变过程。抑癌基因的失活是细胞癌变主要分子机制。研究表明，RASSF1A和APC是肺癌组织中最常见的甲基化抑癌基因，RASSF1A或（和）APC甲基化率高达90%以上；而抑癌基因高甲基化是导致其失活的关键因素。肺癌患者经化疗后体内肿瘤组织细胞死亡，基因组DNA释放至细胞外，被吸收进入血液，因此外周血中甲基化RASSF1A和APC水平升高。本研究通过定量检测肺癌患者化疗前后血浆甲基化RASSF1A和APC水平并与临床治疗转归指标比较，确定化疗后血浆甲基化RASSF1A和APC水平的增高与化疗药物对肺癌细胞杀伤程度的相关性,探讨血浆DNA中甲基化RASSF1A和APC基因定量检测作为NSCLC化疗新的实验指标。

化疗是中晚期非小细胞肺癌临床治疗的主要手段，临床常用RECIST指南和肿瘤标志物来评估化疗效果。但是这些手段提供有效信息的用时较长，因此并不是十分敏感的指标。所以，目前缺乏能够快速评价化疗效果的指标。RASSF1A和APC是肺癌组织中最常见的甲基化抑癌基因，其甲基化率高达90%以上；而抑癌基因高甲基化是导致其失活的关键因素。肺癌患者经化疗后体内肿瘤组织细胞死亡，基因组DNA释放至细胞外，被吸收进入血液，因此外周血中甲基化RASSF1A和APC水平升高。. 本研究通过定量检测316例肺癌患者化疗前后血浆甲基化RASSF1A和APC水平并与临床治疗转归指标比较，确定化疗后血浆甲基化RASSF1A和APC水平的增高与化疗药物对肺癌细胞杀伤程度的相关性，探讨血浆总DNA及RASSF1A和APC基因甲基化定量检测作为肺癌化疗效果评估的新实验指标。首先，选择化疗后24小时的APC /RASSF1A甲基化定量水平来评估肿瘤对化疗药物的反应性。根据实验结果，提出“meth24h>meth0h”是肿瘤对铂类药物敏感的指标。其次，本研究利用总血浆DNA对化疗毒副反应进行监测，并得出结论：不良事件常发生于化疗后DNA升的特别高的患者（DNA24h/DNA0h>2）。因此，化疗24小时后，结合甲基化和总DNA 情况，提出3种模式：（1）任一基因甲基化水平升高同时DNA24h/DNA0h≤2。这种模式说明患者对化疗药物敏感而且无严重毒副反应。（2）任一基因甲基化水平升高但是DNA24h/DNA0h>2。这种模式中，虽然肿瘤对药物反应性较好，但是其毒副反应也较严重。（3）两基因甲基化均无升高。此时无论总DNA如何改变，肿瘤对药物不敏感，说明该化疗方案不是最佳的，需要立即更换化疗方案。. 化疗有效时患者肿瘤病灶会发生相应的改变，但是在患者的症状和体征上却不会及时的反映出来。因此在出现明显症状和体征表现之前，82.4%的患者可利用APC /RASSF1A甲基化检测来更早地准确预测化疗效果。