新肿瘤标志物SP70促进肺腺癌细胞侵袭转移的功能研究

Lung cancer is the leading cause of cancer related death worldwide, mainly due to the occult incidence and lack of early diagnosis and furthermore, metastasis has occurred even before the primary lesions of lung adenocarcinoma which as the main pathological type have been found. NJ001, a monoclonal antibody (McAb), which is specific to lung adenocarcinoma was developed by our research group. SP70 antigen was found locating in cytomembrane and cytoplasm with the molecular weight of 70 kDa. McAb NJ001 could effectively inhibit lung adenocarcinoma cancer cell proliferation, invasion and migration, and induce its apoptosis, however the underlying molecular mechanism is unclear. We present the following hypothesis: SP70, McAb NJ001 recognized antigen, is a key protein of lung adenocarcinoma cell, which plays an important role in the tumor cell invasion and metastasis via its downstream signaling pathway. We will study on the downstream signal pathway of McAb NJ001 recognized antigen to clarify the molecular mechanism of lung adenocarcinoma cancer cell invasion and migration, providing theoretical basis for the diagnosis and treatment of lung cancer with SP70 antigen in the future.

肺癌是世界范围内癌症死亡主要恶性肿瘤，主要归因于其发病多为隐匿性，且缺乏早期诊断的有效手段；更为重要的是肺腺癌作为其主要病理类型，可在肺部原发病灶尚未被发现时已经发生转移。由本课题组前期制备的单克隆抗体NJ001所识别的抗原在肺腺癌细胞中高表达， 并证实该抗原位于肺腺癌细胞胞膜上及胞浆内，其分子量大小为70Kd，因此被本课题组命名为SP70抗原；前期的研究证实，单抗NJ001与活的肺腺癌细胞结合后，可有效抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移，并诱导其凋亡。然而该抗原在肺腺癌细胞中的作用机制仍不明确。我们提出SP70不仅是肺腺癌细胞特异性抗原，同时具有促进肿瘤细胞增殖与侵袭转移的功能，参与调控肺腺癌细胞生长及转移等信号通路这一假设。本研究拟通过对单抗NJ001识别抗原下游信号通路的研究，阐明该抗原在肺腺癌侵袭转移过程中的分子机制，为未来SP70抗原在肺癌诊断与治疗中的应用提供理论基础。

肺癌是世界范围内癌症相关死亡主要恶性肿瘤，主要归因于其发病隐匿，且缺乏早期诊断手段；肺腺癌作为其主要病理类型，可在肺部原发病灶尚未被发现时已经发生转移。本课题组前期制备的单克隆抗体NJ001所识别的抗原在肺腺癌细胞中高表达，并证实该抗原位于肺腺癌细胞胞膜上及胞浆内，其分子量大小为70 kD，因此被本课题组命名为SP70抗原；前期的初步研究证实，单抗NJ001与活的肺腺癌细胞结合后，可有效抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移，并诱导其凋亡。然而该抗原在肺腺癌细胞中的作用机制仍不明确。.通过本课题研究，有以下重要发现，首先鉴定单抗NJ001识别肺腺癌特异性SP70抗原的结构，其结构为一种与鸟嘌呤核苷酸交换因子（RhoGEF）序列具有一定的同源性的新的蛋白，共648个氨基酸序列。标记有胶体金颗粒抗体作用SPC-A1细胞后进行爬片，通过免疫电镜方法直接观察SP70抗原定位，结果显示SP70分布在SCP-A1 细胞膜、细胞浆和细胞核内。其次，本研究证实SP70可参与肺腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移。进一步探讨SP70 抗原在肺腺癌细胞侵袭过程中可能参与的信号通路，发现SP70可通过下调miR-638表达，上调PAK2表达而促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移等功能。本研究还进行了裸鼠动物体内实验研究，通过特异性示踪的裸鼠肺癌动物模型，明确SP70抗体在肺癌动物模型中的特异性靶向作用，并验证了SP70抗原可作为肺癌分子影像诊断的重要分子靶点并可应用于监测肿瘤生长。鉴于SP70可参与肺腺癌侵袭转移，本研究又前瞻性的发现SP70抗原可用于非小细胞肺癌诊断与疗效监测的价值。最后，针对肿瘤免疫治疗的热点问题，前瞻性的发现SP70在肺腺癌微环境中可促进CD4+Treg和CD8+Treg细胞升高，增加肿瘤免疫逃逸，为下一步阐明其调控机制奠定基础。.本研究通过对单抗NJ001识别抗原下游信号通路的研究，阐明SP70抗原在肺腺癌侵袭转移过程中的分子机制，为未来SP70抗原在肺癌诊断与治疗中的应用提供理论基础。