糖尿病相关新型分泌肽－INM02的克隆及其调节胰岛Beta细胞功能的研究

课题组从人胰岛素瘤组织中克隆到一个新型分泌肽-INM02，前期研究显示，INM02在胰岛细胞高表达；制备了INM02的多克隆抗体，建立了检测INM02蛋白的ELISA方法，证实了INM02是一个在血清中可以被检测得到的分泌肽；INM02蛋白在糖尿病人和糖尿病小鼠血清中的含量较相应的正常对照低；高糖能够明显上调胰岛beta细胞INM02基因的表达和蛋白分泌；INM02蛋白干预MIN6细胞后，AKT的磷酸化水平升高，提示INM02发挥作用通过AKT介导的信号通路；建立了mINM02基因条件性剔除小鼠模型；前期研究结果已发表在Journal of Endocrinology杂志上，并申请一项专利。课题组在接下来的工作中，将从细胞水平、糖尿病鼠模型和mINM02基因剔除小鼠模型的层面上，深入研究INM02在调节胰岛素分泌、beta细胞增殖或凋亡过程中发挥的作用，并初步阐明其发挥作用的信号通路。

课题组较好地完成了计划任务书中的研究内容，并增加了新的研究内容，取得了一批重要的研究成果。INM02短期干预后能够促进INS-1、MIN6等胰岛beta细胞的增殖，而长期作用的结果可能抑制细胞增殖，并初步明确INM02通过Akt或ERK介导的信号通路发挥作用。课题组已经成功建立了INM02基因剔除的小鼠模型，发现同野生型小鼠比较，INM02-/-小鼠的空腹血糖明显降低（INM02-/-小鼠：5.3 mmol/L，野生型：7.0 mmol/L, P < 0.05）,糖耐量实验（IPGTT）显示，无论在糖负荷后的哪个时间点（15、30、60、120分钟），INM02-/-小鼠的血糖均显著低于野生型，说明INM02基因缺失能够改善小鼠的糖耐量。此外，高脂餐实验显示，野生型小鼠高脂饲养后体重增加显著，而INM02-/-小鼠体重增加不明显，提示INM02基因也参与了脂代谢。课题组还发现了INM02基因剔除小鼠模型的另外一个重要表型，INM02基因缺失导致雄性小鼠不育，并已初步明确INM02缺失导致雄性不育的分子机制：INM02基因缺失导致与精子动能相关的蛋白酪氨酸磷酸化水平显著下降，从而引起不育。通过上述研究，课题组发现了一个与糖尿病和雄性不育发病相关的新基因，具有重要的科学价值。INM02有望成为临床上糖尿病或雄性不育诊断潜在的分子标志物和治疗糖尿病或雄性不育的潜在药物靶点，具有重要的社会意义及应用前景。受本项目资助，发表SCI论文3篇，申请国内专利1项。