新型钠钙交换蛋白－NCEx的克隆及其功能研究

申请者从人胰岛素瘤组织中克隆到一个新的钠钙交换蛋白(暂时命名为：NCEx)，其核酸序列已得到测序证实，Northern杂交显示其在胰腺和脑组织内表达丰富。本研究旨在：应用基因转染技术，观察转染了NCEx基因的细胞内钙离子浓度的变化以及葡萄糖刺激后胰岛素释放的情况；运用反义寡核苷酸抑制NCEx基因的表达，观察对钙离子浓度和胰岛素释放的影响；构建NCEx蛋白的表达载体，分离纯化蛋白质，制备抗体；用蛋白印迹和免疫组化等方法，从蛋白水平验证NCEx与细胞内钙离子浓度和胰岛素释放的关系。本研究首次在国际上克隆到一个新的钠钙交换蛋白，深入研究其结构和功能，对于阐明细胞内(特别是胰岛β细胞)钙离子浓度的调节、胰岛素的释放以及寻找治疗糖尿病新的药物靶点等具有重要的理论和实践意义。