基于自噬调控PI3K-Akt-mT0R信号通路研究MEBT/MEBO促进糖尿病足创面修复的机制

Diabetic foot is one of the most serious complications of diabetes，which has become an important factor of disability to death due to lack of specially good effect therapy in clinic.To search for new strategies and targets is the hotspot and difficulty in the field of medical research .Researches show that autophagy can maintain cell homeostasis ,involve in cell proliferation, differentiation and promote wound organization reconstruction, PI3K-Akt-mT0R is one of the important signaling pathway. Traditional Chinese medicine treatment in diabetic foot has a long history, the effect is remarkable, MEBT/MEBO is one of the distinguished representatives. Research group previous studys find that MEBT/MEBO could optimization the ultrastructural of intracellular, keep the cell self stability, promote the secretion of cell factor and accelerate the growth of granulation, but the mechanism is not yet fully clear. On this basis,this research uses that method in treating diabetic foot in rats, adopts techniques of immunofluorescence,electron microscope, western blotting and qRT-PCR to discuss the diabetic foot wound repair molecular mechanism of MEBT/MEBO through autophagy based on PI3K-Akt-mT0R signaling pathway,It can provide theoretical and experimental basis for the clinical treatment of diabetic foot by using MEBT/MEBO.

糖尿病足是糖尿病的严重并发症之一，缺乏特效治疗手段，是糖尿病患者致残、致死的重要因素。对治疗新策略和靶点的探寻是当前医学研究的热点和难点。研究表明，自噬具有维护细胞自稳并参与细胞增殖、分化、促进创面组织修复等作用，PI3K-Akt-mT0R信号途径是其重要的调控通路。中医药治疗糖尿病足历史悠久，效果显著，皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)是其中的杰出代表。课题组前期研究表明MEBT/MEBO能明显优化大鼠创面细胞生长超微结构，维持细胞自稳性，促进相关细胞因子分泌，加速肉芽生长，但具体机制尚未完全明确。在此基础上，本研究拟应用本法治疗糖尿病足溃疡大鼠创面，并采用免疫荧光、电镜、Western blotting、qRT-PCR等技术,基于PI3K-Akt-mT0R信号通路，从细胞自噬角度进一步探讨MEBT/MEBO 促进糖尿病足溃疡创面修复的分子机制，为临床应用提供理论和实验依据。

糖尿病足是糖尿病的严重并发症之一，目前缺乏特效的治疗手段，临床治疗十分困难，是糖尿病患者致残、致死的重要因素，为此，探求新的治疗策略和靶点非常必要，是当前研究的热点和难点。研究表明，细胞自噬具有维护细胞自稳并参与细胞增殖、分化、促进创面组织修复等作用，PI3K-Akt-mT0R信号途径是细胞自噬的重要调控通路。中医药治疗糖尿病足历史悠久，效果显著，临床多年实践表明皮肤再生医疗技术(MEBT/MEBO)对糖尿病足等慢性溃疡创面具有良好的疗效，课题组前期研究发现了其对促进细胞因子分泌，促进创面细胞生长增殖具有良好作用，但具体机制尚未完全阐明。本项目在前期研究基础上，采用免疫荧光、电镜、Western blotting、qRT-PCR等技术,通过动物模型和细胞实验，拟基于PI3K-Akt-mT0R信号通路，从细胞自噬角度探讨MEBT/MEBO 促进糖尿病足溃疡创面修复的分子机制。主要研究内容是观察MEBT/MEBO对糖尿病足大鼠溃疡创面病理组织结构及细胞自噬信号调控分子PI3K、Akt、mT0RC1、4EBP1、P70S6K和自噬相关基因LC3、Beclin-1、p62表达的影响，进一步阐明MEBT/MEBO促进糖尿病足溃疡创面修复的分子机制。本项目研究结果表明，MEBT/MEBO在糖尿病足溃疡创面修复过程中，动态调控了PI3K-Akt-mT0R信号通路中关键信号分子PI3K、Akt、mT0RC1、ULK1、4EBP1、P70S6K及自噬相关基因LC3、Beclin-1、p62表达，进而调控糖尿病足溃疡创面的细胞自噬水平，促进糖尿病足溃疡创面愈合，提高愈合率及创面修复质量。研究结果初步从自噬角度探讨了MEBT/MEBO促进糖尿病足溃疡创面愈合的分子机制，为MEBT/MEBO在临床糖尿病足溃疡治疗中的应用提供了一些可能的理论依据。