升清降浊中药对脓毒症心肌p38-MAPK信号转导通路的机制研究

The heart is the target organ in sepsis.A large number of inflammatory medium release and tissue apoptosis in sepsis is the main reason of the heart.Microbial factors transfer signal to the nucleus through cellular signal transduction pathways. If we can block this link, it may become a new target for prevention and treatment of sepsis myocardial dysfunction. Extracellular signal p38 - MAPK is the common channel which cause cell reaction, participate cell proliferation, differentiation, apoptosis, promote a large number of cell factors, NO free radical and apoptosis, it has become a research hot spot in sepsis myocardial depression at home and abroad. Our past clinical practice and basic research confirmed that traditional Chinese medicine Shengjiangsan can improve the clinical syndrome of sepsis, reduce the level of TNF alpha, IL - 6 and the expression of endothelial cell NO in sepsis rats, which has the heart protection. This study based on the previous ones, using the cecum ligation perforation technique (CLP) to prepare sepsis model, and to further clarify the influence of the inflammatory pathways upstream signal P38 - MAPK activation regulation to sepsis myocardial inhibition and the prevention function of Chinese traditional medicine Shengjiangsan, which provide new research basis for the traditional Chinese medicine mechanism in clinical development and sepsis prevention.

心脏是脓毒症易受打击的靶器官，大量炎性介质、自由基和细胞凋亡是造成心肌功能障碍的主要原因。脓毒症时微生物等因素通过细胞转导途径，将信号转至细胞核，引发一系列转录翻译，如能在此环节进行阻断，有可能成为防治脓毒症心肌损伤的新靶点。P38-MAPK是脓毒症重要的细胞外信号转导通路，该通路促使大量细胞因子（TNF-α、IL-6）和一氧化氮（NO）释放，造成细胞凋亡，与心肌损害密切相关，但其作用机制还有待进一步探讨。我们既往临床实践和基础研究证实升清降浊中药能改善脓毒症临床证候、降低脓毒症大鼠血清TNF-α、IL-6水平和内皮细胞NO表达，具有心脏保护作用。本研究在前期研究的基础上，进一步深入阐明炎症通路上游P38-MAPK信号转导通路机制对脓毒症心肌的影响和升清降浊中药的防治作用，为中药制剂的临床开发和脓毒症的防治提供新的研究依据。

[项目背景] P38MAPK信号通路在脓毒症心肌损伤发生发展中起重要作用，调控多种炎症因子、一氧化氮和细胞凋亡过程。研究显示，p38MAPK抑制剂SB203580能有效抑制大鼠全身和局部炎症因子过度释放，减轻机体炎症反应及组织损伤，对脓毒症心脏起到保护作用。.[研究内容] 阐明不同给药浓度的升降散可以降低CLP脓毒症模型大鼠不同时间段血清cTnI、BNP、TNF-α、IL-6水平，降低心肌细胞caspase-3活性，降低p-p38MAPK蛋白水平表达，降低p-p38MAPK mRNA、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA、iNOS mRNA相对值，及心肌细胞病理变化有所改善。.[重要结果及关键数据]升降散低、中、高剂量组和p38抑制组大鼠24小时死亡率均较模型组低。造模后各项检测指标均有所上升。升降散低剂量组、中剂量组、高剂量组各时间节点cTnI均有所下降。低、中剂量升降散组大鼠BNP水平4小时、12小时、24小时均有所降低。高剂量组BNP水平各时间节点有所降低。升降散组中剂量组8小时、12小时、24小时TNF-α水平均明显低于模型组，高剂量组与模型组比较各时间节点均明显下降。升降散低剂量组IL-6水平8小时、24小时IL-6水平低于模型组；中剂量、高剂量组各时间节点均明显低于模型组水平。升降散低剂量组p-p38MAPK蛋白24小时较模型组有所降低；中、高剂量各时间节点p-p38MAPK蛋白表达较模型组降低。升降散中剂量组p-p38MAPK mRNA 8小时、12小时、24小时较模型组均显著下降，高剂量组各时间段均较模型组有所下降。升降散低剂量组caspase-3水平8小时较模型组下降，中剂量组12小时有所下降，高剂量组8小时、12小时较模型组有所下降。升降散中剂量组TNF-α mRNA水平8小时、12小时、24小时较模型组下降，高剂量组各时间段均较模型组下降。升降散中剂量组IL-6 mRNA水平8小时、12小时较模型组下降；升降散高剂量组4小时、8小时、12小时较模型组下降。升降散低剂量组iNOS mRNA水平12小时较模型组下降；中剂量组8小时、12小时、24小时较模型组下降；升降散高剂量组各时间节点均下降。升降散高剂量组24小时心肌细胞形态较模型组改善。