Tim-3/Galectin-9途径通过调节免疫参与幽门螺杆菌慢性持续性感染的机制研究

Global distribution of Helicobacter pylori infection, caused by high rates of infection and its clinical diversity of diseases become one of the serious public health issue affecting human health. Reports display the diversity of Helicobacter pylori and difficult to eradicate and eliminate pathogenic characteristic of recurrence after treatment may be associated with immune disorders. This topic is proposed on the basis of preliminary studies, from the new immunosuppressive molecule Tim-3 to start focusing on the immune negative regulatory Tim-3/Galectin-9 path, first in clinical specimens and animal experiments, fluorescence quantitative PCR, ELISA, and FCM methods such as two angles from mucosal partial and body peripheral circulation explore possible mechanisms Tim-3/Galectin-9 way to regulate the immune status, further blocking the Tim-3 antibody in vitro cell model, over-expression and RNA interference silent Galectin-9 the gene means verify Tim-3/Galectin-9 way to participate in the process of Helicobacter pylori infection, which provide a theoretical basis for the diagnosis and treatment of Helicobacter pylori infection.

幽门螺杆菌感染呈全球分布状态，居高不下的感染率及其引发的临床多样化的疾病成为当今严重影响人类健康的公共卫生问题之一。有报道显示幽门螺杆菌多样化致病、不易根除及根除治疗后易复发的特点可能与机体免疫失调有关。本课题拟在前期研究的基础上，从新型免疫抑制分子Tim-3入手，着眼于免疫负调控Tim-3/Galectin-9通路，首先在临床标本及动物实验中，采用荧光定量PCR、ELISA及FCM等方法，从粘膜局部和机体外周循环两个角度探讨Tim-3/Galectin-9途径调控机体免疫状态可能的机制，进一步在体外细胞模型中，通过Tim-3抗体阻断、过表达及RNA干扰沉默Galectin-9基因的手段，验证Tim-3/Galectin-9途径参与幽门螺杆菌感染的过程，从而为幽门螺杆菌感染的诊治提供理论依据。

H. pylori是慢性胃炎、消化性溃疡、十二指肠球部溃疡、胃癌，胃粘膜相关淋巴组织淋巴瘤的重要致病因素，在1983年首次被Warren与Marshall从患者胃内分离出来后，一直备受关注，WHO已把H. pylori列为一级致癌物。然而，目前对H.pylori导致胃粘膜慢性炎症迁延不愈的致病机制还不是很明了。已有的部分研究表明，在H. pylori感染的免疫应答中传统的CD4+T细胞亚群Th1细胞可能发挥重要作用，但仅仅Th1型免疫应答并不能完全解释H. pylori感染后胃炎的发生。在本研究中不仅探讨Th1型细胞在H. pylori慢性感染免疫中的作用及其可能的阻断机制，而且研究新型CD4+T细胞亚群—Th17型细胞在H. pylori慢性感染免疫中及其与Th1型细胞的关系。Tim-3是2002年发现的新型免疫调节分子，在Th1负调控和免疫耐受中具有重要作用。已经证实半乳凝素-9（Galectin-9）是Tim-3的内源性配体之一，二者相互作用可诱导Th1细胞凋亡。本研究首次在幽门螺杆菌感染中探讨Tim-3/Galectin-9途径是否也参与了T1和Th17相应的免疫调节并引起了感染的慢性持续性的特点。从临床标本、动物体内及细胞水平三个方面，全面的探讨了在H. pylori感染和治疗后Th1和Th17型细胞的表达变化和趋势，在通过对照组、感染组、治疗组小鼠和患者胃组织黏膜病理改变情况、匀浆上清中TNF-α、IFN-γ 和IL-2、IL-17及TGF-β 蛋白含量，RT-PCR 检测胃组织及脾脏中Tim-3、Galectin-9、RORγt 及IL-17 mRNA表达，FCM测定Th1和Th17细胞比例进一步探讨Th1和h17型细胞及其相关细胞因子在H. pylori慢性持续性感染中的作用，并明确Tim-3/Galectin-9在其免疫调节中的关键作用。我们的研究结果与以往的研究结果不完全一直，提示Th1和Th17细胞应答也可能在H. pylori感染的不同阶段分别促进了H. pylori感染的炎症进程。因此，Th1与Th17细胞如何相互作用并协同诱导H. pylori慢性胃炎的发生与发展还需要进一步的研究。