腺相关病毒载体介导MDR1基因导入外周血干细胞的研究

应用分子克隆、MACS、FCM、PCR、MTT、FISH、Southern blot及移植等技术，从MDR、DHFR基因鉴定、AAV载体的构建；转基因后CD34+细胞生物活性、靶基因在体内外表达的持续时间、水平及对化疗药物的耐药性等方面，探讨以AAV为载体，介导MDR1、DHFR入外周血CD34+细胞的基因治疗在提高肿瘤病人对化疗耐受性方面的作用。证实了重组AAV载体可行靶基因的转导，转导后靶细胞具有靶基因表达，且化疗药物对其杀伤作用减弱；转导后CD34+仍具增殖和分化能力，移植后可见裸鼠造血功能的重建，并在体内可检测到靶基因，但时间尚短需长期观察，课题完成过程中，及时增补和改进有关实验内容和方法，严肃认真、专款专用。培养硕士研究生二名。