miR-199在早期妊娠蜕膜化中的功能研究

MicroRNA (small RNA,miRNA) are small non-coding RNAs which are a class of approximately 22 nucleotides in length. Lots of miRNA have been identified in human genome and certain of them have been proved to play roles in decidualization. However, few studies about miRNA in human decidualization have been reported so far. Our previous studies have investigated miRNA expression profile in deciduas by deep sequencing and potential target genes by bioinformatics analysis. Among the differential expression of microRNAs, miRNA-199 was highlight to investigate its function. This study contributes to analyze the style of miRNA-199 regulation by miRNA overexpression and knock-down in vivo and in vitro, which may reveal its role in decidualization and early spontaneous abortion at the molecular level.

MicroRNA(微小RNA，miRNA)是一类长约22个核苷酸的小分子非编码RNA。人基因组中发现大量miRNA在发育及疾病发生过程中有重要作用，但在早期妊娠及流产蜕膜中miRNA功能研究报道很少。课题组前期工作已经利用组学技术发现早期自然流产及早孕蜕膜等组织miRNA的变化情况并完成生物信息分析，获取差异表达microRNA-199。为进一步研究miR-199调控子宫内膜蜕膜化以及参与早期妊娠维持的机制，拟利用干扰及过表达技术分别在体外水平敲减或过表达miRNA-199，同时分别利用转基因技术和敲除技术制备过表达和敲除miRNA-199小鼠模型，在体内及体外水平探讨miRNA的调控机制，深入分析miRNA与靶基因作用的信号通路，阐释microRNA参与子宫内膜蜕膜化的调控机制。

microRNAs（miRNAs）是一种内源性非编码小RNA，以完全或非完全互补的方式与其靶mRNA相结合，通过影响靶基因转录或翻译来调控细胞发育、分化、增殖、凋亡及疾病的发生发展等。在正常妊娠胎盘、绒毛和正常子宫内膜中，一些miRNA差异表达，并与相关基因存在一定的靶向作用，提示自然流产的发生可能与miRNA的表达有一定的关系。但以往研究检测的miRNA数量有限，有关miRNA在人自然流产和早孕蜕膜中具体表达丰度报道较少。课题组分析了 miRNA在自然流产和早孕蜕膜中的表达差异，筛选并验证表达差异显著的miRNA，进一步预测候选miRNA对应的靶基因；同时检测候选靶基因在流产及早孕蜕膜中的表达及意义；进一步体外验证miRNA-199b-5p和SGK1在维持妊娠中的靶向关系和作用，探讨miRNA在自然流产中的作用。研究结果表明早孕蜕膜中特异表达的miRNA可能参与了子宫内膜蜕膜化以及早期妊娠的维持。自然流产蜕膜组织中存在一些表达失衡的miRNA，这些异常表达的miRNA可能与自然流产的发生有关。通过对差异miRNA的GO和KEGG分析，捕获了大量蜕膜化相关的靶基因，并分析出可能与之相关联的细胞信号通路。 体内外实验结果显示miR-199b-5p与SGK1的表达有反向调控关系，miR-199b-5p有可能通过调控SGK1影响早期妊娠维持。