针刺干预脑梗塞微血管新生的分子机制研究

本研究以阻滞大鼠一侧大脑中动脉复制脑梗塞模型为研究对象，以脑梗塞后侧支循环重建的血管新生为切入点，以调控血管新生的特异性因子血管内皮细胞生长因子（VEGF）、血管生成素（Ang1、Ang2）及其对应受体（Flt1、tie2）为观测指标，深入探讨针刺治疗脑梗塞的分子机制。研究首先应用免疫组化双色标记法，以CD31标记脑组织原血管，同时用Ki67特异性标记新生的脑血管，从形态学上揭示脑梗塞后血管新生的规律和针刺的干预效应；应用实时荧光定量PCR技术，准确测定目的基因的mRNA表达量，又同步应用Western blotting 方法，准确测定目标蛋白的表达量，从蛋白和基因水平上揭示脑梗塞后血管新生特异性因子的变化规律和针刺的干预效应；以ki67特异性标记新生血管，同时在一张切片上标记出调控血管新生的VEGF、Ang1、Ang2，准确揭示血管新生与调控蛋白在脑梗塞周边区的时空关系及针刺的干预作用。