NGF调控树突状细胞成熟分化和功能改变致哮喘发生分子机制

T辅助细胞的亚型分化受树突状细胞调控。本课题在我们以前研究发现NGF与哮喘Th1/Th2失衡密切相关基础上，进一步研究NGF诱导树突状细胞成熟分化与功能改变在哮喘发病中的作用。首先通过过敏性哮喘模型，研究证实NGF可引起哮喘模型肺组织内树突状细胞亚型分化和功能发生改变；然后体外培养树突状细胞和从基因敲除小鼠脾脏原代培养树突状细胞，观察NGF刺激后树突状细胞表面信号分子表达、细胞因子分泌、自噬与抗原提呈等功能的改变，并进一步研究这些改变与Th1/Th2失衡的关系；在此基础上研究ＮＧＦ调控树突状细胞成熟分化和功能的细胞内信号转导通路和关键的转录因子，最后采用ｓｉＲＮＡ体内注射沉默基因表达，验证筛选的转录因子在ＮＧＦ诱导的树突状功能异常与哮喘Th1/Th2失衡中的作用，期望阐明哮喘神经-免疫相互作用的细胞分子机制，寻找防治哮喘的新靶点。

本课题在我们以前研究发现神经生长因子（NGF）与哮喘Th1/Th2失衡密切相关的研究基础上，进一步研究发现NGF通过促进肺内树突状细胞（DC）成熟和分化从而促进Th2炎症反应的发生，并且发现这一过程与DC发生自噬密切相关。通过检测过敏性哮喘模型中NGF浓度和向模型中注入NGF抗体的方法，发现NGF能够促进过敏哮喘模型肺组织中DC的活化和向刺激Th2表型分化从而增强Th2炎症反应。同期的研究发现抗NGF抗体能下调哮喘小鼠肺组织的自噬水平，抑制抗原提成细胞的功能，减弱Th2优势的气道炎症。体外实验发现NGF能够诱导小鼠骨髓细胞向CD11c+CD8a– DC分化。NGF能够促进DC细胞的成熟和细胞因子的释放，这一过程中观察到了NGF促进DC自噬发生。进一步研究发现NGF的作用依赖于LPS刺激导致DC表达的p75NTR受体，NFkB经典和非经典途径中的转录因子与这一过程密切相关。提示拮抗DC表面 p75NTR受体可减轻NGF导致的Th2炎症，而DC内NFkB可能是预防过敏性炎症发生的靶点。