CD4CD8双阴性T调节细胞的体外转化通路调控及对同种异体免疫反应的抑制作用

CD4-CD8- T调节细胞（DN T细胞）在诱导和维持器官移植免疫耐受中起重要作用，由于数量极少，扩增困难，缺乏特异表面标志物用以分离等缺点，难以获得大量细胞开展深入研究。我们最先发现了成熟CD4+ T细胞在活化增殖后可以转化为DN T细胞（发表在2007年BLOOD杂志上），为深入研究其作用机理提供了可能。目前对此转化通路的调控以及转化后的DN T细胞的免疫调节机制还不明确。我们拟通过阻断DN T细胞超高表达的颗粒酶B（Granzyme B），研究其对DN T细胞免疫抑制功能的影响；对CD4 T细胞活化具有重要作用的共刺激通路进行研究，明确其在DN T细胞转化中的调控作用进行研究，从而对体外转化通路进行优化；利用小鼠移植模型对DN T细胞与免疫抑制剂的相互作用进行深入研究，从而明确体内联合应用DN T细胞和免疫抑制剂的可行性，以减少临床免疫抑制剂使用量和使用时间，最终诱导移植免疫耐受。

CD4-CD8- T 调节细胞（DN T 细胞）在诱导和维持器官移植免疫耐受中起重要作用，我们最先报道了成熟CD4+ T 细胞在活化增殖后可以转化为DN T 细胞，为深入研究其作用机理提供了可能。本课题主要研究免疫抑制剂对DN T 细胞的生存、增殖的影响，明确现有免疫抑制剂对DN T 细胞及其免疫调节功能的影响，寻求联合应用方案，以期减少临床免疫抑制剂用量， 减少免疫抑制剂的毒副作用，增强免疫抑制功能。 本课题组发现，在体外混合淋巴细胞培养中，DN T细胞在体外可以显著抑制CD4+CD25- T细胞的分裂增殖，而外源性IL-2可以明显增强DN T细胞的抑制功能，提示IL-2与DN T细胞联合应用的可能；体内进一步实验研究显示应用低剂量雷帕霉素（Rapamycin）和DN T细胞联合治疗，可以有效抑制T细胞针对同种异体抗原的分裂增殖，并有效诱导活化T细胞的凋亡，外源性IL-2融合蛋白（IL-2/Fc）的引入可以进一步增强上述免疫调节效果，显示低剂量Rapamycin，DN T细胞和外源性IL-2的体内应用对T细胞的同种异体免疫反应起到协同抑制作用。低剂量Rapamycin对DN T细胞显示轻度抑制作用，而此抑制作用可以被外源性IL-2纠正。 本课题研究显示，DN T细胞具有抑制T细胞增殖，诱导活化T细胞的凋亡的作用，联合应用Rapamycin和外源性IL-2，可以达到协同作用，进一步增强DN T细胞对同种异体免疫反应的抑制作用。