三种复方蒙药不同用法对糖尿病肾病大鼠模型治疗作用机制解析及药物靶点研究

Diabetic nephropathy is a major public health problem and increasing dramatically worldwide. Compound recipe of Mongolian medicine is widely used with high pharmacological efficacy. However, there has not been a comprehensive study of its molecular pathogenesis. Here，we aim to investigate the functional mechanisms of three important Mongolian medicine compound preparations sugemule-10, narenmandula, xieriga-4 in diabetic nephropathy rat model. Assessment of rats' urine, blood, tissue pathology is used to evaluate drug efficacy. Furthermore, we'll measure gene and protein expression in rat models to understand the mechanisms of drug's protection and immuno-regulation. In conclusion, our research will support a better understanding of Mongolian medicine' functional mechanism and is valuable for Mongolian medicine development.

发糖尿病肾病是正在危害人类健康的疑难病症。蒙医临床上采用蒙药复方制剂联合应用方法治疗肾脏疾病取得了良好疗效。但蒙药复方现代研究相对薄弱，缺乏药物作用机制和靶点等基础研究，严重制约其进一步开发利用。本课题从前期工作中已筛选出的肾功能保护作用最好的苏格木勒-10、那仁满都拉、协日嘎-4味汤三种蒙药复方制剂入手，在不同用药方法下(复方联用、复方单用)，利用现代分子生物学技术和方法对其进行保护肾功能分子机制研究。通过考察药物对大鼠糖尿病肾病模型尿液、血液生化及组织病理等指标筛选有效实验组，进而利用免疫组化法、酶联免疫法及基因扩增法测定相关蛋白质及其受体表达，对其保护肾功能作用进行比较。研究的主要目的为初步阐明蒙药复方传统用药方法（复方联用）优越性的分子生物学基础；初步阐明所选3种复方的肾脏保护作用机制及药物作用靶点，为其进一步开发利用奠定坚实的基础。

目的：建立糖尿病肾病大鼠模型，选用苏格木勒-10、那仁满都拉、协日嘎-4汤等三种蒙药复方制剂，观察三种蒙药制剂不同用法对模型动物相关指标的影响，测定肾组织中相关蛋白质的表达，探讨该三种蒙药的肾功能保护作用机制，观察三种蒙药一日单方和一日多方用法的药理作用差异。. 方法：建立链脲佐菌素（STZ）所致糖尿病肾病模型，用三种蒙药一日单方（苏格木勒-10、那仁满都拉、协日嘎-4汤，一天两次，分早晚给药）及一日多方（早：苏格木勒-10；晚：那仁满都拉及协日嘎-4汤）给药法，进行糖尿病肾病动物实验，观察三种蒙药对模型大鼠的体重变化、肾脏指数、血清肌酐（Cre）、尿素氮（Ure）、白蛋白(ALB)、肾组织病理的影响及对肾组织中基质金属蛋白-2（MMP-2）、转化生长因子β1（TGF-β1）、胰岛素生长因子Ⅱ（IGFⅡ）、血管紧张素Ⅱ（ANGⅡ）、血生长激素（GH）等蛋白质表达水平的影响。.结果：结果表明，与正常组相比较，模型组大鼠的体重明显下降，血糖及肾脏指数明显增高，血清Cre、Ure、ALB显著升高。肾脏组织发生显著病变，肾组织中MMP-2、TGF-β1、IGF2、ANG2及GH表达显著增高。与模型组比较，联用药组大鼠血糖明显降低，血清Cre显著下降，血清Ure有下降趋势，病理损伤明显减轻。那仁满都拉组大鼠的体重增加显著，血糖明显降低，血清Ure和ALB有下降趋势。协日嘎-4汤组大鼠血清ALB含量有升高趋势，病理变化减轻。苏格木勒-10组大鼠血清Cre显著降低，血清ALB有降低趋势，肾脏指数显著增加。各给药组大鼠肾组织中MMP-2、TGF-β1、IGF2、ANG2、GH的表达水平有了不同程度的下降，其中联用药组、那仁满都拉组及协日嘎-4汤组优于苏格木勒-10组。.结论：三种蒙药复方制剂一日单方和一日多方用药均表现出一定的肾功能保护作用，且表现形式各不相同。其中三种药联合用药可使STZ诱导大鼠糖尿病肾病动物模型的血糖及血清Cre、Ure明显降低，可减轻肾脏病理损伤。那仁满都拉可使模型大鼠的体重增加，降低血糖。协日嘎-4汤可使模型大鼠血清ALB升高，病理变化减轻。苏格木勒-10可使模型大鼠血清Cre降低。三种蒙药肾功能保护机制可能与下调肾组织中MMP-2、TGF-β1、IGF2、ANG2、GH表达水平有关。三种药联合用药其肾功能保护作用优于一日单方用药。