绿脓杆菌噬菌体PaP3的整合位点及整合酶的研究

溶原性噬菌体在宿主菌基因组中的整合与切割作用介导了基因在宿主菌间的水平转移，对于生物多样性的形成具有重要意义；而噬菌体中的整合位点与整合酶是进行整合作用的关键因素与必要条件。噬菌体PaP3是本室新近完成全基因组测序和注释并在GeneBank上登录的新发现的噬菌体（AY 078382或NC 004466），但其整合位点及整合酶尚未鉴定，然而它们在溶原性噬菌体的生命活动中又是必不可少的。本项目拟①通过适当的限制性酶切、分子克隆及DNA序列测定等方法鉴定PaP3基因组的整合序列及其在宿主菌基因组上的整合位点；②鉴定、克隆、表达整合酶基因，并利用整合反应进行功能鉴定；③利用DNaseⅠ足纹法鉴定整合酶在DNA上的特异性识别和切割位点序列。该项目的研究将为阐明噬菌体介导的基因转移和由此而产生的生物多样性提供实验依据。