噬菌体phi C31整合酶的细胞内机制研究

噬菌体 phi c31整合酶介导外源基因在基因组中的特异性整合为转基因生物和基因治疗领域目前最有希望的方法之一。但是其在高等生物细胞中的分子机制还没有阐明。本研究以前期酵母双杂交和c31整合酶与DNA结合试验的有关数据为线索，研究阐明c31整合酶与人类细胞蛋白质和基因组的相互作用机制，探讨c31介导的外源基因整合对细胞功能状态的影响及细胞内相互作用蛋白对c31整合酶活性的影响。在此基础上，探索使用定点突变方法提高c31整合酶的特异性和整合效率，减低对细胞毒性作用，从而完善基于c31整合酶的基因转移体系；进一步通过构建含有c31整合酶DNA结合区的杂和分子来使目前使用的慢病毒等载体的获得特异性整合特性。这些研究将为提高转基因操作和基因治疗的安全性及有效性提供理论依据和技术支持。