链霉菌噬菌体ФC31整合酶在牛细胞中介导外源基因高效整合机制的研究

链霉菌噬菌体ФC31整合酶可介导含attB位点和外源基因的质粒载体在人、小鼠和果蝇基因组中的假attP位点处高效整合。推测人基因组中约有100～1000个假attP位点。我们的研究表明牛基因组中也存在整合酶可识别的假attP位点，且目前已得到两个出现频率较高位点的序列。本项目首次在牛细胞株及原代培养细胞中利用整合酶介导外源基因高效整合，筛选和建立转基因细胞株，对出现几率较高的一些假attP位点进行克隆和染色体定位，分析整合位点的旁侧序列，研究整合酶在牛细胞中介导高效基因整合的机制，摸索外源基因在假attP位点处整合的规律，为牛的功能基因组研究提供信息；并以这些转基因细胞作为供体细胞生产克隆牛，考察假attP位点处基因的整合在克隆牛生产过程中的应用价值，最终为利用整合酶在牛基因组中进行转基因、基因修饰、基因功能研究，以及创建动物疾病模型和有商业价值的动物模型奠定理论基础和提供技术支持。