具有醌还原酶诱导活性的withanolide类迈克尔反应受体分子的快速发现及作用靶点

迈克尔反应受体分子(MRA)为一类能与亲核试剂发生迈克尔加成反应的化合物。一些MRA能与Keap1的巯基发生迈克尔加成反应并激活Keap1-Nrf2信号通路，从而诱导醌还原酶(QR)表达。Withanolide(WL)类MRA分布于酸浆属等植物，但通常的提取、分离等方法不能有目的地发现QR诱导活性的WL类MRA。在前期的工作中，我们建立了基于LC-MS技术的MRA的快速发现方法；研究了一些活性MRA激活上述通路的可能途径；并推测一些活性MRA还可能与其它含巯基的蛋白作用并激活上述通路。本项目在工作基础上，建立基于LC-MS技术的从酸浆属植物快速发现活性WL类MRA的方法，并运用基于活性的蛋白谱学研究方法，以WL为底物合成分子探针，鉴定活性WL类MRA特有作用靶点，研究特有靶点与QR诱导的关系，发现新的QR诱导剂作用靶点。本研究为具有QR诱导活性的化合物发现提供新的来源、方法和靶点。

迈克尔反应受体分子(MRA)为一类能与亲核试剂发生迈克尔加成反应的化合物。一些MRA能与Keap1的巯基发生迈克尔加成反应并激活Keap1-Nrf2信号通路，从而诱导醌还原酶(QR)表达。Withanolide(WL)类MRA分布于酸浆属等植物，但通常的提取、分离等方法不能有目的地发现QR诱导活性的WL类MRA。本项目在前期工作基础上，对酸浆属植物挂金灯(Physalis. alkekengi var. franchetii)、小酸浆(P. minima)、 灯笼果(P. peruviana)、苦蘵(P. angulata)、毛苦蘵(P. angulata var. villosa)和毛酸浆(P. pubescens) 提取物进行的醌还原酶诱导活性筛选，基于建立的LC-MS技术的以GSH为底物的从酸浆属植物快速发现活性WL类MRA的方法，有目的地对酸浆属植物中的具有醌还原酶诱导活性的化合物进行研究，发现了多个具有高活性的化合物，并运用分子生物学的研究方法，以高活性的WL为探针，研究其作用靶点，初步发现Cdc25C可能与醌还原酶诱导有关；本项目同时对挂今灯抗类风湿作用进行的动物水平的研究。通过研究，阐明了我国产酸浆属植物中具有醌还原酶诱导活性的化合物，并提出Cdc25C可能与醌还原酶诱导相关，为研究具有QR诱导活性的化合物发现提供新的来源、方法和靶点。