益气活血法对大鼠萎缩性胃炎HSP70转录调控的分子机制研究

在国家自然科学基金（30572388）课题研究中发现：HSP70表达与萎缩性胃炎的进展密切相关，益气活血法能促进萎缩性胃炎胃黏膜腺体细胞HSP70基因的表达，发挥胃黏膜保护作用。采用目前较为公认的方法建立萎缩性胃炎大鼠模型，研究益气活血法对大鼠萎缩性胃炎HSP70基因转录调控的分子机制。率先进行萎缩性胃炎HSP70转录调控机制的研究，首次将量子点探针介导的激光扫描共聚焦显微镜技术引入中医药治疗萎缩性胃炎的研究领域，重点研究转录因子HSF1、Strap、GAF、PARP与HSP70表达的相关性，阐明益气活血法治疗萎缩性胃炎的作用靶点，揭示益气活血法对大鼠萎缩性胃炎HSP70转录调控的机制，同时作为HSP70诱导剂，比较益气活血法代表药物与阳性对照药替普瑞酮治疗萎缩性胃炎的疗效，明确二者在调控HSP70转录及蛋白表达水平的作用差异，阐明其作用靶点的异同，为益气活血法的临床应用提供科学依据。

本课题组已完成所有研究计划。课题组在国家自然科学基金（30572388）课题研究基础上，继续运用幽门弹簧植入术配合高盐热淀粉糊灌胃法制备萎缩性胃炎大鼠模型，进一步规范了该模型制备的操作流程，建立胃粘膜萎缩效能与对数造模时间的时效曲线方程，使研究者对该模型病理的进展更加清晰可控。该模型综合了高热、高盐、高淀粉、胆汁反流、弹簧物理刺激等多种因素，以胃窦粘膜萎缩为主，其血清PGE2、胃泌素水平低于正常，符合我国人群萎缩性胃炎发病特点，是一种稳定、便捷的萎缩性胃炎大鼠模型，值得进一步推广应用。首次将量子点探针介导的激光扫描共聚焦显微镜技术引入中医药治疗萎缩性胃炎的研究领域，使实验结果精度进一步提高，为今后科研采用该项新技术，提供了很好的借鉴作用。率先研究益气活血药黄芪、三七对萎缩性胃炎HSP70基因表达的作用机制，明确其对HSP70基因转录因子热休克转录因子1（HSF1）、p300 的应激反应激活子（Strap）、转录因子GAGA（GAF）、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）表达的影响，阐明了益气活血药黄芪、三七及其配伍治疗萎缩性胃炎与诱导保护蛋白HSP70表达相关，黄芪、三七、黄芪三七配伍、替普瑞酮均可以促进HSP70蛋白表达，但其作用机制不同，黄芪可通过HSF1、GAF、PARP、Strap共同作用促进HSP70基因表达，而三七则通过GAF、PARP共同作用促进HSP70基因表达，黄芪三七配伍通过GAF促进HSP70基因表达，替普瑞酮通过GAF、PARP共同作用促进HSP70基因表达。其结果进一步揭示：黄芪诱导HSP70基因表达效果优于三七、黄芪三七配伍和替普瑞酮，可能成为具有潜力的HSP70蛋白诱导剂，更广泛地应用于保护多种组织和细胞，具有广阔的临床应用前景。