蜕膜NK细胞功能多样性与妊娠母-胎识别和耐受机理

实验证据提示，蜕膜NK细胞包括多种亚群，其表型和功能各异。某些亚群可能参与调节妊娠母-胎免疫识别和耐受的建立和维持机制，另一些则参与抗感染机理。本项目拟在多年研究工作基础上，采用磁珠亲和细胞分选、多色流式细胞术、二维电泳、质谱分析、Western Blotting和transwell细胞共培养方法等，利用流产患者蜕膜、小鼠自发性流产和各种免疫缺陷模型，针对蜕膜调节性NK细胞的产生、迁移、细胞间相互作用和对Toll样信息转导的调控等生物学行为进行系统研究，逐步揭示这些细胞与母-胎免疫识别和耐受的关系，阐明蜕膜NK细胞与树突状细胞相互作用的模式，解析这些细胞所参与的信息转导通路中上、下游关键分子的相互关系，丰富和发展母-胎免疫识别和免疫豁免理论，为提高妊娠相关疾病预防和诊治水平，提供科学依据。

研究背景：妊娠相关疾病发病机制目前尚不清楚。针对这一生命科学基本问题深入研究，为相关疾病预防和诊治水平的提高提供实验基础。主要研究内容：1. 系统研究恒定型NKT (invariant natural killer T, iNKT)细胞在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)通过Toll样受体4 (Toll-like receptor-4, TLR4)诱发妊娠失败的机制。2. 系统研究CpG-TLR9信息途径与妊娠失败的关系。3. 尝试用FTY720诱导CD25-细胞转化为调节性T细胞。4. 系统研究转录因子stathmin-1调控胎盘滋养层细胞增殖、迁移和侵袭的机制。重要结果和关键数据：1. 系统阐述了iNKT细胞在LPS通过TLR4诱发妊娠失败的机制。利用iNKT细胞缺陷的小鼠模型，采用LPS刺激后小鼠蜕膜活化型CD11c+、CD3+和CD49b+细胞数量显著降低，提示iNKT细胞在TLR4信息转导机制中发挥重要作用。2. 发现用LPS刺激时Jα18-/-小鼠胚胎吸收率显著低于野生型小鼠。在蜕膜iNKT细胞与LPS刺激的树突状细胞（dendritic cell, DC）共培养后，IFN-γ和IL-17水平显著增高，提示蜕膜iNKT细胞以Th1和Th17型因子依赖性模式参与LPS诱发型妊娠失败机制。3. 发现CpG-TLR9通过活化巨噬细胞、增强TNF-α表达而导致流产或早产发生。发现趋化因子mKC调控巨噬细胞迁移。4. 其他科学发现。科学意义：上述发现为逐步阐明母-胎免疫耐受机制和妊娠相关疾病发病机制、提高预防和诊治针对性，提供了实验依据。