Pin1异构酶对鼻咽癌细胞转化的影响及其机制

研究表明：Pin1异构酶在人类多种肿瘤中高表达，而转录因子（TFs）在鼻咽细胞恶性演进过程中起关键性作用。本课题拟以TFs为靶点，探测Pin1异构酶对鼻咽癌细胞转化的影响及机制。（1）通过建立稳定表达Pin1野生型、突变型C109A及基因沉默的鼻咽癌细胞株，在体内外探测Pin1对鼻咽癌细胞转化的影响。（2）机制探讨：采用哺乳动物双杂交筛选出在鼻咽癌细胞内可能与Pin1作用的靶TFs，再检测靶TFs的转录活性、DNA结合能力、细胞转化能力及致瘤能力是否为Pin1依赖性，然后用枯草杆菌酶解反应分析靶TFs是否受Pin1的异构保护。根据Pin1结合特征，对靶TFs氨基序列中可能结合的磷酸化丝/苏氨酸位点突变、免疫共沉淀及GST-Pin1 pulldown，寻找Pin1与TFs结合的氨基位点。以上问题的解决，将为Pin1在鼻咽癌细胞转化中的作用机制提供新的研究思路，也将为鼻咽癌的防治提供重要靶点。

鼻咽癌是一种在中国南方常见的恶性肿瘤，尤其广东省是高发地区，故有“广东癌”之称。在鼻咽癌细胞内存在多个转录因子的异常活化及高磷酸化状态，而磷酸化蛋白质构型的改变是受Pin1异构酶的变构作用而实现的。. 本项目在我们已发现重要线索的基础上，以转录因子ATF1为靶点，探测Pin1异构酶所调控的转录因子活性在鼻咽细胞恶性转化过程中起关键性作用。本项目研究结果显示，(1) Pin1在鼻咽癌组织高表达而在癌旁及炎症组织中低表达；（2）Pin1和ATF1在鼻咽癌中高表达并存在相关性；(3)Pin1和ATF1增强鼻咽细胞恶性表型；(4) Pin1与ATF1存在相互作用；(5)ATF1转录活性受Pin1异构酶调节；(6)Pin1启动子多态性与鼻咽癌发病风险相关。而且还探讨了Pin1调节的信号通路。本项目的完成阐明活化的转录因子在鼻咽细胞恶性转化等过程中起重要作用，而且是受Pin1调控而实现的，发现了导致鼻咽癌细胞恶性转化的新机制，为鼻咽癌诊断和治疗提供新的潜在靶点。