青娥丸补肾生髓治疗绝经后骨质疏松调节骨微血管机制的研究

Osteoporosis (OP) is a "consumptive"、"Gubi" and "bone atrophy" areas. Qing'E formula is one of the classic recipe commonly used in treatment of postmenopausal osteoporosis. It has the effect of kidney gluten and Yiqihuoxue which can improve the human microcirculation. But the exact mechanism is unknown in prevention OP. Recent studies show that the OP is closely related to bone microcirculation and bone forming ability. The reduced bone microvascular can lead microcirculation maybe one of the pathogenesis of the OP. The preliminary study found that bone microvascular changes of the structure and function is close relationship with advanced micro build of OP. Therefore, we propose "the OP bone microvascular pathology hypothesis" that improve bone microvascular endothelial function can prevention and control OP. Based on the theory of "bone marrow microcirculation", this study will further analysis of bone marrow composition and vascular characteristics of bone microarchitecture and biomechanics on the basis of preliminary work. As the guiding of "kidney main bone marrow" theory, to quantitative evaluate osteoporosis vertebral bone marrow microcirculation law in castrated rabbit menopause model by imaging method. We will dynamic analysis the relationship between yiqihuoxue of Qing'E formula and improve bone perfusion and promote bone marrow stem cell proliferation and into bone differentiation. In order to confirm the association between "kidney - fine - marrow - bone", We hope to reveal the effect and mechanism of Qing'E formula prevention OP.

骨质疏松症（OP）属于"虚劳"、"骨痹"、"骨痿"的范畴。青娥丸系治疗绝经后骨质疏松的常用经典方剂之一，具有补肾强筋、益气活血之功效，能改善人体微循环，但其防治OP的确切机制不明。近期的研究表明OP与骨微循环及骨形成能力密切相关，骨微血管减少导致微循环障碍可能是OP的发病机制之一。本前期研究发现骨微血管结构和功能的改变与OP骨超微构筑关系密切，因此，我们提出"OP骨微血管病理假说"，即改善骨微血管内皮功能可达到防治OP之目的。基于"骨髓微循环障碍"理论，本研究拟在前期工作基础上，进一步分析骨髓组成结构和血管特性与骨微结构、生物力学关系。同时，以"肾主骨生髓"理论为指导，运用影像方法定量评价去势兔绝经后骨质疏松模型椎体骨髓微循环灌注规律，动态分析青娥丸益气活血与改善骨髓灌注功能、促进骨髓间干细胞增殖和成骨分化之间的关系，以期证实"肾-精-髓-骨"之间的关联，揭示青娥丸防治OP的作用及其机制。

本项目通过临床研究观察青娥丸对绝经后骨质疏松症患者的临床疗效，并通过建立大鼠绝经后骨质疏松模型，以青娥丸进行干预，进一步探索其可能的作用机制，以期为临床改善绝经后骨质疏松提供可靠的理论依据和新的治疗思路。通过临床研究评价补肾生髓经典方剂青娥丸对绝经后骨质疏松症肾虚证患者临床症状、体征以及骨代谢标记物、骨密度指标变化。70 只SD 雌性大鼠随机分为假手术组（SHAM 组）、去势组（OVX 组）、青娥丸组（QEW 组）和雌激素组（E2 组）。通过检测骨密度、骨髓灌注参数、骨代谢标志物、血管内皮标志物表达情况以及骨微结构变化评价绝经后骨质疏松症的作用并分析及其可能的作用机制。临床试验发现治疗组骨密度、成骨标记物治疗后较治疗前均有所升高。动物实验：（1）骨髓灌注参数：①股骨远端：治疗后OVX 组Ktrans、Kep、Ve 水平较治疗前均有明显降低，E2 组和QEW 组Ktrans、Kep、Ve 水平较治疗前均有明显增加；与OVX 组比较，治疗后E2 组和QEW 组Ktrans、Kep、Ve 水平均显著增加；而治疗后，QEW 组Ktrans 水平显著低于E2 组。②股骨中端：治疗后OVX 组Ktrans 及Ve 水平较治疗前显著降低，E2 组Ktrans、Kep 及Ve 水平均明显增加；与OVX 组比较，E2 组Ktrans、Kep 及Ve 水平均显著增加，QWE 组Ktrans、Ve 水平显著增加。③股骨近端：E2 组Ktrans 及、Ve 水平较OVX 组均显著增加。（2）青娥丸组治疗后可改善骨质疏松骨密度及提高成骨水平。（3）E2 组和QEW 组CD31 及VEGF 蛋白表达及相对表达量较OVX组均显著上调。（4）与OVX 组比较，QEW 组、E2 组TBV%均显著升高，TBV%、TFS%、MAR、mAR 和OSW 均显著降低，与SHAM 组比较，E2 组TFS%、MAR、mAR 和OSW 均显著增高，而QEW 组则无明显差异。提出：（1）青娥丸能够有效减轻绝经后骨质疏松症患者临床症状、改善中医症候，能够有效控制骨矿物质代谢水平，一定程度上提高雌激素水平和椎体骨密度水平。（2）青娥丸治疗绝经后大鼠骨质疏松症，可能与调节骨代谢、雌激素样作用、改善骨微结构以及提高骨髓灌注、改善骨髓微循环等作用机制相关。