利用启动子捕获技术克隆香蕉特异性启动子

目前已经克隆到的香蕉特异性启动子极少，有关在香蕉根、叶、韧皮部、维管束等组织器官特异表达启动子，以及病原菌等诱导表达启动子的研究尚未见报道。在本实验室已建立高效香蕉基因转化体系的基础上，我们拟构建以GUS/GFP融合基因作报告基因的启动子陷阱植物表达载体，通过根癌农杆菌介导转化香蕉（如巴西香蕉、威廉斯香蕉、贡蕉或大蕉）胚性悬浮细胞，构建无启动子报告基因随机插入整个基因组的突变体库（包括转基因细胞克隆和植株）。主要从突变体库筛选报告基因被低温或香蕉枯萎病病原菌诱导表达的株系，以及报告基因在根、叶片、韧皮部或维管束特异表达的株系。然后采用TAIL-PCR等方法从报告基因的旁邻序列中分离启动子序列，并对获得的启动子进行功能分析。通过本研究可获得一批具有很强创新性的自主知识产权的香蕉特异性启动子，对实现利用基因工程技术培育优质香蕉这一最终目标具有显著的促进作用。