Noth信号通路调控细胞免疫参与HBV感染慢性化机制研究

Hepatitis B is a kind of severe infectious diseases in China, and the major threaten is the chronic infection. Research showed that the change of immune response was the main cause of HBV chronic infection. Notch signal pathway involve in the regulation of innate and adaptive immunity, which maybe the critical signal participate in the regulation of immune response during the chronic infection of virus. However the mechanism of notch signal pathway in regulates cell immune response of HBV infected individuals is still unclear. The results of our pilot study showed that Notch expressed on CD4+T cells, and immune response changed after blocking Notch signal. So our study will focus on the relationship between Notch signal and the immune response of individuals with HBV infection. Various stages of HBV infected individuals, including chronic hepatitis B (CHB) and asymptomatic HBV carrier (AsC) will be recruiting for case-control study and cohort study. RT-PCT, ELISPOT,FACS methods will be used to evaluating the relationship between Notch signal and Th1,Th2,CD4+CD25+Treg,DC,CTL cells immune response, clarify the mechanism of Notch signal participating the immune response of HBV infected individuals. The accomplishment of this study will enrich the mechanism of HBV chronic infection, and provide a new method and chance for clinical cell immune regulation based therapy for hepatitis B.

乙肝是我国重大传染病，其最大危害是感染慢性化。研究表明HBV感染慢性化的主要原因是细胞免疫功能改变。既往研究已经证实Notch信号参与宿主免疫调节是病毒感染慢性化过程中调节细胞免疫应答的重要信号通路。但是Notch信号参与HBV感染慢性化的具体作用机制目前尚不清楚。课题组前期研究显示HBV感染者CD4+T细胞表达Notch信号分子，且阻断Notch信号细胞免疫应答水平发生改变。因此本课题以Notch信号与HBV感染者细胞免疫应答的关系为切入点，开展病例-对照研究、队列研究，结合RT-PCR、ELISPOT、FACS等技术，检测Notch信号通路与宿主细胞免疫应答水平，分析Notch信号与Th1、Th2、TReg、DC、CTL等细胞免疫应答的关系，揭示Notch信号参与调控HBV感染者细胞免疫应答的机制。项目的完成可以进一步阐明乙肝慢性化分子机制，并为乙肝临床免疫治疗提供新思路，带来新机遇。

乙肝是我国重大传染病，HBV感染慢性化威胁居民健康。HBsAg阴转，HBeAg阴转，是慢乙肝(CHB)临床转归重要事件，通过分子流行病学方法，探讨分析HBsAg阴转影响因素，分析HBeAg阳性者HBeAg阴转的影响因素，以及Notch等基因多态性与HBsAg阴转，HBeAg阴转的关系，为CHB预后评估提供参考资料。.主要研究内容：①建立基于医院的HBV 感染者队列，基于社区人群的HBsAg 阳性无症状携带者队列。②定期开展队列随访进行HBV 血清学指标、病毒学指标检测，细胞因子检测。③开展HBsAg 阳性无症状携带者队列随访数据进行分析，探讨Notch基因多态性与HBsAg 阳性无症状携带者HBsAg自然清除的关系。④开展巢式病例-对照研究，探讨慢性乙肝患者的临床转归及影响因素。⑤采用分子流行病学方法分析HBeAg阳性乙肝患者发生HBeAg转阴的影响因素。.取得重要结果：①建立基于医院的HBV感染者队列（2239例），建立了来自社区人群的HBV感染者队列（1192例）。.②以HBV感染队列随访发生HBsAg自然清除者定义为病例组，采用巢式病例对照研究方法，根据随访过程中HBsAg持续阳性者作为对照组，分析探讨Notch基因多态性与HBsAg自然清除的关系, 多因素 Logistic 回归分析结果显示， 60 岁以上 (OR=3.142, 95%CI:1.333-7.408, P=0.009)、Notch3 基因 rs1043994 位点 CT 基因型(OR=1.820, 95% CI:1.057-3.133, P=0.031)及 TT 基因型(OR=5.576, 95%CI:1.051-29.590, P=0.044)、Notch4 基因 rs367398 位点 AA 基因型(OR=2.891, 95%CI:1.172-7.131, P=0.021)与HBsAg 自然清除相关。.③研究发现HBV DNA载量大于2000IU/ml，ALT大于2倍正常值的HBV感染者IL12p27, INF-γ,IL-10, IL6,IL-9,IL-10的水平在特异性增加；IL-13,IL-4.IL-5水平在HBV感染后HBsAg阴转者特异性增加；TNFα在肝硬化患者中表现特异性增加。.④分析HBeAg阳性乙肝患者发生HBeAg转阴的影响因素。针对634例HBeAg阳性的慢性乙肝患者，