基于细胞因子和NF-κB相互作用探讨臭牡丹干预神经病理性痛的分子机制

有研究表明神经免疫系统参与了神经病理性痛的形成，细胞因子是联系神经-免疫的关键分子。致炎细胞因子可影响谷氨酸释放、炎症介质合成及NF-κB表达和功能；而NF-κB又可调节参与伤害性反应和神经元可塑性变化的细胞因子表达。提示细胞因子和NF-κB间的相互作用在神经病理性痛的发生发展中起重要作用。我们的实验发现臭牡丹具有抗炎镇痛作用，但不能被纳络酮所阻断，说明非阿片系统参与其中；进一步研究显示臭牡丹可明显缓解神经病理性痛的痛敏行为和降低大鼠脊髓中TNFα、IL-1β、IL-6的表达，但其作用机制不清楚。为此，本项目拟在已有工作基础上，应用神经药理学、细胞生物学、形态学、RT-PCR、Western-blot、高效液相法、ELISA和共聚焦激光扫描等技术，以细胞因子和NF-κB相互作用为研究切入点，揭示臭牡丹对神经病理性痛的作用及其机制，为寻求治疗神经病理性痛的新靶点和药物提供理论和实验依据。

本课题以细胞因子和NF-κB相互作用为研究切入点，揭示了臭牡丹对神经病理性痛的作用及其机制。结果显示：剂量为10g/kg 和30g/kg 的臭牡丹可显著减轻神经病理性痛的机械痛敏和热痛敏，以30g/kg效果更明显；臭牡丹明显降低神经病理性痛脊髓背角的谷氨酸含量；臭牡丹显著降低神经病理性痛脊髓背角的细胞因子（TNF-α、IL-1β 和IL-6）表达，并且在蛋白水平可见臭牡丹显著降低神经病理性痛脊髓背角的IL-17表达；在术后21天，臭牡丹可明显降低神经病理性痛脊髓背角COX-2的基因表达，并且在蛋白表达水平有下降趋势；臭牡丹对神经病理性痛脊髓背角iNOS的基因表达的作用不明显；臭牡丹可明显降低神经病理性痛脊髓背角NF-KB的基因表达，并且显著降低NF-κB(50kd )的蛋白表达水平，NF-κB(65kd )的蛋白表达有下降趋势；臭牡丹作用于神经病理性痛大鼠模型后，脊髓背角的GFAP蛋白表达水平有下降趋势；臭牡丹可明显升高神经病理性痛脊髓背角p-NR2B的蛋白表达水平，并且对NR2B的蛋白表达作用有升高趋势。以上实验表明臭牡丹对神经病理性痛的痛敏有缓解作用，其作用机制可能通过抑制致炎细胞因子（TNF-α、IL-1β 、IL-6和IL-17）激活的NF-κB信号途径，进而抑制炎症介质（致炎细胞因子和COX-2的生成）的表达；同时通过抑制脊髓背角神经元中谷氨酸的释放来发挥作用。