Toll样受体介导的TRIF信号通路在脑缺血预适应炎症抑制中的作用研究

脑缺血预适应启动机体内源性炎症抑制机制是其重要保护机制之一。为探讨Toll样受体TLR3和TLR4介导的TRIF信号通路是否参与脑缺血预适应炎症抑制过程，建立小鼠脑缺血预适应保护模型，检测此过程中脑组织炎症反应变化，及TLR3、TLR4、TRIF信号通路接头蛋白TRIF、关键转录因子IRF-3及产物IFN-β、IL-10等在脑组织表达量；进一步应用TLR3、TLR4及TRIF 基因敲除小鼠，观察脑缺血预适应保护和缺血脑组织炎症反应的改变。建立小鼠海马脑片缺氧缺糖预适应保护模型，观察TRIF siRNA、抗IFN-β和抗IL-10抗体对脑片氧糖剥夺损伤及组织炎症反应的影响。进一步应用TRIF信号通路激活剂Poly(I:C)预处理，观察其对整体和离体脑缺血损伤的保护作用。对脑缺血预适应炎症抑制机制的探讨，将有助发现新的有效的药物预适应靶点，为脑缺血等疾病防治提供新思路。

脑缺血预适应启动机体免疫炎症抑制反应是其重要内源性保护机制之一。为探讨Toll样受体TLR3介导的TRIF/IFN-β信号通路是否参与脑缺血预适应炎症抑制过程，我们建立了整体小鼠缺血预适应保护模型，在整体模型上观察到短暂脑缺血预处理可显著升高大脑皮质星型胶质细胞TLR3的表达，进一步我们采用离体星型胶质细胞培养建立细胞水平的缺血缺氧预适应保护模型，同样在离体星型胶质细胞上观察到短暂缺血缺氧预适应显著增加TLR3表达，且预适应可抑制随后氧糖剥夺导致的致炎因IL-6升高和TLR4、pNF-κB蛋白表达增加，预缺血缺糖处理还升高抗炎因子IFN-ß分泌和上调细胞中TRIF、pIRF3蛋白表达。进一步我们采用TLR3-TRIF信号通路激活剂Poly（I：C）预处理，观察其对整体小鼠脑缺血再灌损伤及脑组织炎症反应影响，及对离体星型胶质细胞氧糖剥夺损伤的保护作用。结果提示0.3mg/kg Poly I:C肌肉注射给药能明显改善小鼠神经缺陷，减少脑梗死体积，降低缺血再灌小鼠血清TNF-ɑ含量，并提高血清中IFN-ß含量。在星型胶质细胞水平上Poly I:C预处理组能减轻细胞缺血缺氧损伤，抑制缺血缺氧细胞培养液中炎性因子IL-6分泌，促进IFN-ß分泌增加，并促进细胞中TRIF、pIRF3表达。本文首次证实星型胶质细胞TLR3介导的TRIF信号通路参与了脑缺血预适应保护过程，进一步阐明脑缺血预适应保护机制，并为脑缺血防治提供新的靶点和思路。