SLE患者B淋巴细胞特异性调控因子的筛选及功能机制研究

课题开展SLE患者B淋巴细胞活化异常机制的创新性研究。采用染色质免疫共沉淀（ChIP），CpG岛芯片,限制性标记基因组扫描（RLGS）技术对样本中组蛋白H3K4me3，H3K27me3，H3乙酰化及CpG 岛甲基化状态进行分析，获得SLE患者B淋巴细胞全基因组组蛋白H3K4me3，H3K27me3，H3乙酰化及甲基化状态发生改变的CpG岛，利用荧光定量PCR验证候选基因启动子区域的甲基化及乙酰化状态，并明确其候选基因表达情况，分析H3K4me3，H3K27me3，H3乙酰化及CpG 岛甲基化对其表达的调控机制。进一步运用siRNA及药物5-氮胞苷、丙戊酸探讨特异候选功能基因其组蛋白H3K4me3，H3K27me3，H3乙酰化及CpG岛甲基化状态在SLE发病机制中所伴演的角色。项目开展极可能挖掘一些新的特异表观调控候选因子，成为诊断标记物及药物靶点，为开发新型B细胞靶向治疗生物制剂积累资料。

课题开展SLE患者B淋巴细胞活化异常机制的创新性研究。采用染色质免疫共沉淀（ChIP）、CpG岛芯片、限制性标记基因组扫描（RLGS）技术对样本中组蛋白H3乙酰化、H3K4me3、H3K27me3及CpG 岛甲基化状态进行分析，首次获得或发现：(1)SLE患者外周血B淋巴细胞编程紊乱的全基因组组蛋白H3乙酰化、H3K4me3、H3K27me3及DNA甲基化CpG岛图谱；(2)获得了SLE特异性组蛋白H3乙酰化、H3K4me3、H3K27me3及DNA甲基化候选功能基因，证实其与SLE患者B淋巴细胞异常活化相关；(3)运用RNAi可特异性使SLE患者的B淋巴细胞H3K4me3水平降低或/和H3K27me3水平升高；(4)药物5-氮胞苷可明显抑制SLE患者B淋巴细胞的DNA甲基化，药物丙戊酸可增强其H3乙酰化；(5)初步建立了SLE患者B淋巴细胞紊乱相关的组蛋白H3乙酰化、H3K4me3、H3K27me3及DNA甲基化调控网络模型。上述结果揭示了候选功能基因及其组蛋白H3乙酰化、H3K4me3、H3K27me3及CpG岛甲基化状态在SLE发病机制中所扮演的角色，为发现诊断标记物和药物新靶点提供了可能性。此外，本项目在国内外核心期刊发表研究论文4篇，其中2篇为SCI收录。申报国家专利3项。在本项目研究成果的基础上，课题组先后中标广西省自然基金1项、深圳市课题4项。以本项目为依托，共培养博士研究生1名和硕士研究生4名。总而言之，本项目取得了预期的研究成果，并基本完成了预期的考核指标。