PrkC/PrpC系统调控鸡毒支原体粘附的分子效应研究

鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum, MG）的sps1/ptc1基因分别编码PrkC（MGA_0459）/PrpC（MGA_0461），这是MG中最为重要的Ser/Thr蛋白激酶系统。本研究运用mini-Tn4001转座子缺失技术对鸡毒支原体PrkC/PrpC系统进行缺失，并利用已构建的pSoriC/Gm载体对该缺失株进行PrkC/PrpC系统互补试验，结合双向电泳技术、Pro-Q/Flamingo双染和磷酸化多肽的质谱（MS）分析技术鉴定磷酸化蛋白的差异性，旨在研究PrkC/PrpC系统对MG粘附素的磷酸化修饰的调节作用。

本研究原计划运用mini-Tn4001转座子缺失技术对鸡毒支原体PrkC/PrpC系统进行缺失，并利用已构建的pSoriC/Gm载体对该缺失株进行PrkC/PrpC系统互补试验，结合双向电泳技术、Pro-Q/Flamingo双染和磷酸化多肽的质谱（MS）分析技术鉴定磷酸化蛋白的差异性，旨在研究PrkC/PrpC系统对MG粘附素的磷酸化修饰的调节作用。在实际操作过程中，我们成功构建了mini-Tn4001转座子载体，并积极摸索了基于oriC的定向载体缺失技术，遗憾的是，我们并没有筛选到PrkC和PrpC的缺失株，为整个后续研究带来了巨大的困难。但我们对PrkC、PrpC、GroEL、Enolase、LicA、TipA等诸多相相关联的功能蛋白和底物进行了解析，先后在转座子载体构建和这几种蛋白功能领域发表9篇中英文论文，其中4篇为SCI收录，目前还在投2篇SCI论文，1篇已经修回，培养了3名硕士研究生毕业，达到了预定的技术指标和数量指标。