鸡毒支原体HSP60（GroEL）蛋白诱导DF-1细胞凋亡的分子机制

Mycoplasma gallisepticum (M. gallisepticum) is the most important pathogen which causes chronic respiratory disease in poultry. Our previous study showed that the restructuring GroEL protein of M. gallisepticum can adhesion on the surface of host cell DF-1 and induce the cell apoptosis, and the GST pull-down results demonstrated that the rGroEL protein can interaction with apoptosis related proteins: chicken membrane protein A2 (Annexin A2). In this study, the host intracellular proteins interacted with GroEL and the relevant signal pathway will be identified, which will provide theoretical basis for new vaccines development and the prevention and control of M. gallisepticum.

鸡毒支原体（Mycoplasma galliseticum，M. gallisepticum）是引起鸡慢性呼吸道疾病的病原体，广泛存在于国内外的养禽场中，给养禽业造成巨大的经济损失。我们前期研究发现：鸡毒支原体重组GroEL蛋白能够粘附在鸡胚胎成纤维细胞（DF-1）的表面并诱导该细胞发生凋亡，通过GST pull-down技术，初步筛选到与GroEL蛋白互作的凋亡相关蛋白：鸡膜联蛋白A2（Annexin A2）。本项目拟在此基础上，进一步鉴定与鸡毒支原体GroEL蛋白相互作用的受体蛋白Annexin A2，并确定二者诱导DF-1细胞凋亡的信号通路，阐释鸡毒支原体的致病机制。其研究结果将为鸡毒支原体病的防控和疫苗的研发提供理论依据。

鸡毒支原体（M. gallisepticum）是引起鸡慢性呼吸道疾病的重要病原体，其脂质相关膜蛋白（LAMPS）是诱导宿主先天免疫应答的主要因子。支原体的膜蛋白在支原体与宿主细胞的互作方面发挥着关键作用，膜蛋白具体的生物学功能仍不明确。本研究发现鸡毒支原体脂质相关膜蛋白（LAMPS）组分可以诱导DF-1细胞分泌IL-1β。实验显示：鸡毒支原体LAMPS组分可以激活NF-κB信号通路，髓样分化初级应答蛋白 88以及Toll样受体2在鸡毒支原体LAMPS激活NF-κB信号通路中起着关键作用。在本研究中，我们发现LAMPS组分中GroEL蛋白可以诱导鸡外周血单个核细胞发生凋亡，但其具体机制仍不十分清楚。我们克隆了GroEL基因并在大肠杆菌中表达，将重组蛋白的生物学功能进行了鉴定。实验结果显示GroEL蛋白能粘附到DF-1细胞和外周血单个核细胞且GroEL蛋白能够结合Annexin A2蛋白。GroEL蛋白能够刺激PBMC的Annexin A2蛋白的表达上调，敲低Annexin A2蛋白的表达可以降低GroEL蛋白诱导的PBMC的凋亡。综述所述，鸡毒支原体LAMPS组分通过TLR2和MyD88信号分子激活NF-κB信号通路诱导IL-1β的分泌；鸡毒支原体GroEL蛋白可以通过与宿主细胞Annexin A2蛋白相互作用诱导宿主细胞凋亡，为鸡毒支原体致病机制的研究提供了新的视野。