miR-150调控内皮祖细胞修复血管内皮介导阻黄血管低反应性

Patients with obstructive jaundice exhibit low reactivity to vasoactive drugs, which is one of the reasons for higher perioperative complications and mortality. However, the mechanisms remain unclear. Endothelial is impaired in resistance vessels from rats with obstructive jaundice and then endothelial progenitor cells (EPCs) mobilize from the bone marrow into the peripheral blood to repair the damaged blood vessels. We hypothesize that hyperbilirubinemia could reduce the number of circulating EPCs and inhibits its function, thereby promoting vascular hyporeactivity in obstructive jaundice. We previously have found increased expression of miR-150 in jaundice EPCs. This study focused on the regulation of EPCs function by mir-150 from the whole animal, cellular and molecular level to find the key points and regulatory molecules of vascular hyporeactivity in patients with obstructive jaundice. This study can be beneficial to the pathogenesis of unstable blood flow dynamics and provide new ideas for perioperative safety in obstructive jaundice patients.

阻塞性黄疸患者对血管活性药物的低反应性是手术麻醉中常见的一个问题，是围术期并发症发生和死亡率增高的原因之一，但机制目前仍不明了。阻塞性黄疸时阻力血管内皮受损，血管内皮祖细胞（EPCs）从骨髓动员到外周血参与损伤血管的修复，我们假设高胆红素血症减少循环EPCs数量并抑制其功能，从而促进阻塞性黄疸血管低反应性的发生发展。前期研究发现miR-150在黄疸患者外周血EPCs中表达增高，因此本研究着眼于miR-150调控EPCs功能，从整体动物、细胞和分子等多个水平基于miR-150调控机制探讨黄疸对EPCs功能的影响，初步明确miR-150调控EPCs功能的关键的作用点和调控分子，并进一步阐明EPCs功能受损可能是阻塞性黄疸患者血管低反应性的重要机制之一。为阻塞性黄疸病人血流动力学不稳定的发病机制提出可能的解释和理论依据，为临床保证阻黄疸病人围术期安全提供新思路。

本课题在分离培养内皮祖细胞之后发现microRNA150在胆汁孵育之后并无明显变化，内皮祖细胞回输之后大鼠血管低反应性也无统计学差异；在多次重复试验后我们发现，胆汁酸对内皮祖细胞的迁移分化能力存在抑制作用；结合最新的文献报道我们猜想，阻塞性黄疸或者胆汁酸可能对内皮祖细胞向内皮细胞的转化存在抑制作用；内皮祖细胞是血管新生及损伤修复的重要因素；后续体内体外实验结果也证明胆道梗阻及胆汁酸对内皮祖细胞促血管新生及损伤修复的抑制作用。体外细胞实验表明，胆汁酸膜受体TGR5的激活可明显抑制内皮祖细胞的迁移与成管能力，特异性敲减TGR5之后，内皮祖细胞迁移、成管能力在胆汁酸与TGR5特异性激动剂存在的情况下得到恢复；在体实验表明，内皮祖细胞TGR5敲减回输可逆转胆汁酸对损伤修复的抑制作用。我国为肝脏疾病大国，众多肝脏疾病患者需要做肝脏切除手术，而患者术前又多有胆道梗阻，病理生理情况复杂。肝脏切除术后涉及肝脏再生，再生过程中血管新生又是极其重要的环节。本课题首次成功发现胆汁酸及其受体TGR5在内皮祖细胞促血管新生中的作用，将为肝脏切除术后及肝移植术后肝脏再生乃至人工肝脏研究提供新的理论依据。