长链非编码RNA影响胃癌发生的机制研究及其诊断价值分析

长链非编码RNA(lncRNA)是一类新发现的长度超过200nt的非编码RNA，通过调控基因的表达参与胚胎发育和组织分化等生命活动过程。lncRNA的异常表达可导致肿瘤的发生和发展，而它们是否可作为标志物用于肿瘤的诊断、特别是它们与胃癌的关系迄今尚未明确。本课题组最近在胃癌组织中发现了一些高表达和低表达的lncRNA，为此，本研究拟采用定量RT-PCR和生物信息学等技术鉴定与胃癌发生密切相关的lncRNA；然后通过基因转染或RNA干扰技术上调或下调胃癌细胞和正常胃黏膜上皮细胞中lncRNA的表达，并结合RNA Pull-down和Western印迹等技术查明lncRNA影响胃癌细胞生长的分子机制；再经裸鼠移植瘤实验明确其对胃癌细胞生长的影响；最后通过比较正常人、良性胃病患者、胃癌前病变患者和胃癌患者血浆中lncRNA的检测率，确定有诊断价值的若干种lncRNA，以提高胃癌的非创性诊断水平。

长链非编码RNA(lncRNA)是一类新发现的长度超过200核苷酸的不编码或很少编码蛋白质的RNA 分子。近年来研究表明，lncRNA 的异常表达可导致肿瘤的发生，而它们是否可作为标志物用于肿瘤的诊断、特别是它们与胃癌的关系在本课题立项之前尚未明确。.本课题的主要内容包括：(1)比较胃癌组织和癌旁组织中lncRNA的表达谱，筛选出若干种胃癌相关 lncRNA。(2)上调和下调 lncRNA 在胃癌细胞、正常胃黏膜上皮细胞中的表达，寻找lncRNA 影响胃癌细胞生长的关键分子。(3)在实验动物水平上分析目标lncRNA对胃癌生长的影响及主要机制。(4)比较胃癌患者、胃癌前病变患者、良性胃病患者和正常人血浆中lncRNA的检测情况，确定胃癌相关lncRNA的临床诊断价值。.本课题揭示了胃癌相关lncRNA的表达谱，发现在胃癌组织中表达水平较低的lncRNA有FER1L4、uc001lsz、BG491697、AF131784、uc009ycs、BG981369、AF147447、HMlincRNA1600和AK054588，高表达的lncRNA有H19、HMlincRNA717、BM709340、BQ213083、AK054978和DB077273；阐明了3种lncRNA (GACAT3、FER1L4和RMRP)通过靶向miRNA、调控抑癌基因表达和影响细胞周期等机制在胃癌发生、发展中的发挥重要作用；建立了基于血液和胃癌lncRNA实时定量RT-PCR检测的胃癌诊断新方法，确定了7种胃癌相关lncRNA (GACAT1、GACAT2、GACAT3、FER1L4、ABHD11-AS1、LINC00152和AA174084)的临床诊断价值，对于提高胃癌的诊治水平做出重要贡献。有3种lncRNA被国际人类基因组组织(HUGO)正式命名为第1至第3种胃癌相关转录本(gastric cancer associated transcript)——GACAT1、GACAT2、GACAT3；共发表SCI收录论文12篇（其中：TOP期刊1篇，ESI高被引论文1篇，SCI 二区4篇，总影响因子47.088），国内一级核心期刊论文3篇，国际会议交流论文3篇，全国性学术会议分组报告2篇，申请发明专利2件，培养研究生4名，学生获第三十届全国青少年科技创新大赛一等奖和“十佳青少年科技创意之星“称号。