IL-18/IRAK/TRAF-6信号通路在ITP发病中的分子机制研究

研究发现：IL-18/IRAK/TRAF-6信号通路可通过NF-κB调控INF-γ等细胞因子表达，诱导免疫紊乱，参与自身免疫疾病的发生发展。但IL-18/IRAK/TRAF-6通路在ITP中的作用尚不不清楚。前期研究发现ITP患者体内IL-18，IRAK 和TRAF-6含量明显升高，而IL-18的天然拮抗剂-IL-18BP含量没有明显变化，IL-18体系明显失衡。大剂量地塞米松能够促进IL-18BP的生成，拮抗IL-18通路的作用而缓解ITP的发病。本项目将应用RNA干扰和慢病毒载体构建等分子、细胞生物学技术，从小鼠ITP模型为切入点，以IL-18体系对细胞内Th1和Th2型细胞因子的免疫调节为突破点，研究IL-18的作用阻止或延缓ITP的发生和发展，为进一步阐明ITP发病机制，寻找ITP治疗的新靶点提供重要的理论和实验依据。

原发免疫性血小板减少症（ITP）是一种自身免疫介导的血小板减少综合症，其核心发病机制是细胞免疫功能异常：T细胞亚群功能异常和细胞因子比例失调导致B细胞激活产生大量抗体，细胞毒性T细胞活化，造成血小板生成减少和破坏增多。IL-18作为T细胞炎症介质强有力的诱导者，通过刺激Th1型反应，诱导Th1/Th2失衡。但是IL-18体系对ITP中Th1/Th2免疫调节的具体机制尚不清楚，且缺乏有效的干预措施。本项目在前期已完成的体外细胞实验基础上，提出脾脏和外周血单个核细胞中IL-18通过促进胞浆内IRAK分子表达，进而结合活化TRAF-6分子，诱导Th1型细胞分化的假设，通过动物在体实验证实IL-18/IRAK/TRAF-6信号传导途径在ITP发病中发挥重要作用。研究结果显示，主动型慢性ITP模型小鼠中IL-18表达明显升高，内源性IL-18BP的表达无变化，IL-18BP/IL-18体系失衡。阻断IL-18并不影响细胞表面IL-18受体的表达，却下调IRAK的表达，同时下调衔接分子TRAF-6的表达量，抑制Th1型转录因子T-bet和细胞因子IFN-γ的产生，促进Th2型转录因子GATA-3和细胞因子IL-10的表达，纠正Th1/ Th2偏倚。通过RNA干扰手段分别阻断IL-18、IRAK、TRAF-6，IL-18/IRAK/ TRAF-6信号通路在不同靶点上被抑制，均可使ITP模型小鼠的血小板数目得到不同幅度的回升，抗血小板CD61抗体显著下降，Th1/ Th2偏倚得到有效逆转。本项目通过IL-18/IRAK/TRAF-6信号传导途径解释了ITP中IL-18调节T细胞炎症免疫反应的机制，为研究ITP的发病机理提供了新理论，为ITP的治疗提供了新靶点。