miR-155介导的角膜溃疡及其免疫病理损伤机制研究

绿脓杆菌感染导致的免疫病理损伤是造成急性化脓性角膜炎的主要原因，然而其调控机制并不清楚。预实验结果显示，绿脓杆菌感染小鼠角膜后，miR-155表达显著上调，提示miR-155可能参与了角膜免疫调控。进一步实验显示，miR-155可以抑制病原菌清除，放大角膜炎症反应，诱导角膜溃疡穿孔。那么，miR-155抑制细菌清除并放大炎症反应的机制是什么？我们通过预实验发现，miR-155可以抑制巨噬细胞对细菌的吞噬杀伤功能，并上调促炎因子的表达。由此，我们首次提出"miR-155通过抑制病原菌清除，放大炎症反应诱导角膜溃疡"的假说。本项目拟通过动物模型和体外实验深入研究miR-155介导角膜溃疡的免疫病理机制，找到miR-155在角膜炎中的作用靶点，为预防和治疗化脓性角膜炎，降低其致盲率，提供可靠的理论依据。

绿脓杆菌角膜炎是致盲率最高的眼部疾病之一，其能在短时间内引起急性化脓性角膜感染，导致基质组织坏死，角膜溃疡，甚至穿孔失明；然而其调控机制并不清楚。研究发现，miRNA广泛参与机体抗感染免疫应答和炎症反应。本课题针对miR-155在绿脓杆菌角膜炎中的作用及机制，从机体和细胞水平开展了如下研究内容：..1）确定绿脓杆菌角膜炎中miR-155表达变化及其与病情关系；2）揭示miR-155在绿脓杆菌角膜炎中的作用和机制；3）从细胞水平进一步阐明miR-155抑制细菌清除、放大炎症反应的机制；4）深入探讨miR-155通过哪些靶点抑制巨噬细胞吞噬杀伤、放大炎症反应。.本项目研究miR-155介导的角膜溃疡及其免疫病理机制，取得的主要研究成果和关键数据包括：.1）首次揭示绿脓杆菌感染小鼠角膜、人角膜及巨噬细胞后，miR-155表达呈时间依赖性和菌量依赖性上调。敲除miR-155降低角膜细菌载量，减轻角膜炎症反应和免疫病理损害。.2）发现miR-155不仅通过抑制吞噬受体的表达，调控巨噬细胞对绿脓杆菌的吞噬，而且通过下调iNOS、减少NO产生，抑制巨噬细胞介导的绿脓杆菌杀伤。.3）阐明miR-155促进Th1型细胞因子IFN-及促炎因子IL-6，IL-1，IL-12P40及IL-17A的表达而抑制抑炎因子IL-10的表达，放大角膜炎症反应的免疫病理损伤机制。.4）进一步研究，发现miR-155通过靶向下调Rheb蛋白表达，从而抑制巨噬细胞吞噬和清除绿脓杆菌。.总之，本项目通过动物模型和体外实验，深入研究了miR-155介导角膜溃疡的免疫病理损伤机制，首次发现miR-155的作用靶点，这些研究为预防和治疗化脓性角膜炎，降低其致盲率，提供可靠了可靠的理论和实验依据。