艾菲提蒙汤抗动脉粥样硬化的作用及分子机制研究

艾菲提蒙汤是维吾尔医经典方剂，对动脉粥样硬化症有确切的疗效、有效率为90%以上，初步试验结果表明艾菲提蒙汤有一定调血脂作用、并未毒性，但其抗动脉粥样硬化（AS）的作用及分子机制尚未清楚。因此，本项目在前期工作的基础上，以抗AS 的作用及分子机制为研究对象，采用现代科技手段，通过建立家兔AS模型，分别观察艾菲提蒙汤对AS形成和消退的影响；在此基础上，采用ELISA、Western bolt、Real-time PCR等技术方法，主要从降脂、抗氧化、抗炎、抑制血管平滑肌迁移和增殖等方面对一些相关因子进行检测，从分子水平阐明艾菲提蒙汤抗AS的作用靶点，发掘维药抗AS多途径、多靶点的作用优势，为临床安全、有效用药提供实验依据，同时为该方剂的进一步研究奠定基础。

本项目采用喂养法构建家兔AS模型，并给与药物进行干预，分别通过预防性给药和治疗性给药，观察艾菲提蒙汤对家兔实验性AS形成的影响及对家兔AS消退作用。通过主动脉病理形态学、血脂变化等指标的检测，明确抗AS的药理作用。在此基础上，采用生物化学、分子生物学等方法，通过检测艾菲提蒙汤对AS家兔血清TC、TG、LDL-C、HDL-C含量以及对LDLR基因表达的影响；检测AS家兔血清NO、SOD、GSH-Px、CAT、MDA含量；采用荧光定量PCR技术检测其对AS家兔主动脉eNOS、LOX-1表达的影响；采用ELISA试验检测其对炎症敏感性指标hs-CRP以及VCAM-1的影响；采用免疫组化和Western Blot检测其对NF-κB表达的影响；采用细胞免疫组化法研究其对PCNA和PDGF-A的影响，采用Western Blot法检测PCNA蛋白表达。实验结果表明，艾菲提蒙汤可明显降低兔血清中TG、TC、LDL-C含量，对HDL-C无明显影响；可明显改善主动脉病理形态结构；明显增加LDL-R的表达；可显著提高SOD、CAT、GSH-Px、NO活性，降低MDA的含量，减轻脂质过氧化物对血管内皮的损伤；可显著抑制兔主动脉LOX-1 mRNA表达，减轻了oxLDL对内皮细胞的损伤效应，有效阻止AS的发生发展；能增加eNOS的表达，促进eNO合成；可明显降低家兔血清中hs-CRP、VCAM-1的浓度，并明显降低血管中NF-κB的表达；可通过抑制PDGF-A、PCNA的表达有效地抑制VSMC增殖。综上所述，艾菲提蒙汤可通过调节脂代谢紊乱、抗脂质过氧化、保护血管内皮功能，可调节多种参与炎症反应、免疫反应、细胞增殖反应的细胞因子，进而发挥抗AS的形成、发展和稳定易损斑块的作用，其抗AS机制是通过多靶点、多途径共同作用的结果。