利用iNOS特异抑制肽构效关系计算机辅助设计iNOS抑制剂

以iNOSN端、iNOSFAD结合区、nNOSCaM结合区为靶标，用大肠杆菌对之重组表达，纯化制备上述靶蛋白。经噬菌体多肽库展示筛选，获得iNOS和nVOS特异结合单克隆。经体外NOS抑制活性测定，筛选出10个iNOS特异抑制肽和10个nOS特异抑制肽，基因测序，推导出其氨基酸序列，用化学法合成之，进一步证实其活性。通过计算机辅助构效关系分析，设计并合成100多个小分子化合物。经筛选得到4个INOS选择性抑制化合物，其中P98018的IC50为10（-8）M。在MCAO模型上，于脑缺血后2和24hivP98018，显著减少梗塞面积，改善行为缺陷症状，显效剂量为0.25mg/kg，选择性抑制缺血脑组织的iNOS活性，阻止NO过量产生。与现有抗中风药相比特点突出，已获得国家新药基金资助。