固本防哮饮对哮喘易感基因ADAM33、ORMDL3调控及信号转导通路影响的研究

研究发现哮喘患儿存在肺脾肾不足的体质状态，固本防哮饮是名老中医经验方，临床研究已证实该复方能改善哮喘患儿体质状态，防治哮喘。前期实验研究已建立了稳定可靠的哮喘缓解期动物模型及模型评估体系，证实该复方能降低气道高反应性、改善支气管周围炎性细胞浸润。国内外研究表明，ADAM33、ORMDL3是在一定程度上反映哮喘体质，并与哮喘易感性密切相关的基因。本项目拟通过体内和体外实验，研究固本防哮饮对哮喘易感基因ADAM33、ORMDL3及相关调控蛋白、细胞因子、信号转导和转录激活因子1（STAT1）的表达，气道重塑及哮喘诱发表型等的影响，采用激光共聚焦扫描显微技术、基因体外转录、Real-time PCR、Western Blot、ELISA等实验技术，从RNA、蛋白水平及细胞、组织形态学等不同层次探讨固本防哮饮防治哮喘的作用机理，多层次、多靶点揭示中药复方改善哮喘患儿体质、防治哮喘的作用机制。

中医药在调整患儿体质，提高机体抵抗力，减少减轻哮喘发作方面具有独特的优势。固本防哮饮是江苏省中医院全国著名儿科专家江育仁教授经验方。临床研究发现该复方能改善哮喘患儿体质状态，防治哮喘。前期实验研究证实该复方能明显降低哮喘模型小鼠气道高反应性、改善支气管周围炎性细胞浸润。本项目通过体内和体外实验，采用先进的分子生物学实验技术，研究固本防哮饮对哮喘易感基因ADAM33、ORMDL3及相关调控蛋白、细胞因子、信号转导和转录激活因子1（STAT1）的表达，气道重塑及哮喘诱发表型等的影响。体内研究结果显示固本防哮饮可通过降低小鼠血清中IgE及肺泡灌洗液中IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-13、TNF-α、TGF-β1及肺组织中上述指标的mRNA的表达，升高各组小鼠肺泡灌洗液中IL-12及肺组织中IL-12 mRNA的表达，在一定程度上减轻哮喘模型小鼠的气道炎症，黏液高分泌，改善气道重塑，下调哮喘易感基因ADAM33、ORMDL3、STAT1、ETS-1的高表达。体外实验结果显示，IL-4能促进人支气管上皮细胞增殖，呈浓度与时间依赖，固本防哮饮含药血清能抑制IL-4引起的增殖作用，固本防哮饮含药血清能降低IL-4引起的哮喘易感基因ADAM33、ORMDL3、STAT1及ETS-1的高表达。因此，固本防哮饮能通过调控哮喘易感基因的表达，从而调整哮喘患儿的体质，提高机体免疫力，发挥防治哮喘的作用。