新肿瘤抑制因子LZTFL1在肿瘤转移中的作用及其机制研究

我们前阶段的工作发现LZTFL1是一个新的肿瘤抑制因子，本项目将进一步研究LZTFL1在肿瘤转移中的作用及机制。LZTFL1在人多种肿瘤中表达下调，诱导分化后的结肠癌上皮细胞中LZTFL1表达上调并与E-cadherin共定位于质膜上，提示LZTFL1可能通过抑制肿瘤中E-cadherin介导的EMT从而抑制肿瘤转移的发生。我们将以结肠癌上皮细胞HT-29为模型，证实LZTFL1是否能抑制血小板衍生生长因子诱导HT-29细胞的EMT及EMT细胞表型和相关分子标记的变化；并进一步研究LZTFL1和E-cadherin/beta-catenin分子间的相互作用，以确定可能的分子机制；收集结肠癌临床标本，分析LZTFL1的下调是否与肿瘤转移相关，评价LZTFL1在预测结肠癌患者存活率的预后价值，为全面阐明LZTFL1在肿瘤发生发展尤其是侵袭转移中的作用机制以及可能的临床诊治应用提供新的依据。

前期工作表明LZTFL1是一个新的肿瘤抑制因子，其表达与胃癌病人的生存及预后相关，本研究着重于LZTFL1在胃癌侵袭及转移中的作用及潜在的分子机制。.（1）通过免疫组化染色检测311对胃癌病人正常及肿瘤组织芯片，显示高表达 LZTFL1 的胃癌病人，有较长的总生存时间（58个月，95% CI, 28-128个月），而低表达LZTFL1 的胃癌病人总生存时间短（27个月，95%CI， 23-35个月，p值小于0.01），研究明确了LZTFL1在胃癌中的临床意义。（2）通过Transwell 实验检测胃癌细胞的的转移及侵袭能力，明胶酶谱实验检测胃癌肿瘤细胞的MMPs活性，实验结果表明LZTFL1的表达水平与胃癌肿瘤细胞的分化程度相关，过表达LZTFL1能抑制胃癌细胞上皮-间质转化（EMT）相关分子标记物的表达，并抑制胃癌肿瘤细胞的EMT相关的细胞表型，包括迁移，侵袭，及肿瘤细胞的基质金属蛋白酶的活性。（3）免疫共沉淀及Duolink in situ proximity ligation assay (PLA) 实验表明LZTFL1与细胞质β-catenin相互作用，LZTFL1能抑制β-catenin的核易位。.结论：LZTFL1通过抑制β-catenin的核异位抑制胃癌细胞上皮间质转化，为治疗胃癌转移提供了一个新的治疗靶点。