重组HSV-1靶向激活DC诱导CTL抗肺癌免疫应答的实验研究

树突状细胞（dendritic cells， DCs）具有强大的"交叉递呈"外源性抗原的能力,基于其在抗瘤免疫应答中的重要性,以及我们既往发现的局部放射激活DC抗肺癌免疫应答的局限性,本项目拟利用减毒I型单纯疱疹病毒NV1066对肿瘤细胞感染的靶向性及增殖活性,构建含共表达MIP-3α及TNF-α基因并可全身应用的重组HSV-1病毒,靶向感染肿瘤细胞,在肿瘤组织局部高表达MIP-3α及TNF-α,趋化?活化未成熟DCs至瘤灶局部,激发CTL抗瘤免疫应答;通过"跨室"联合培养和移植瘤模型体外内实验,观察重组病毒感染LLC细胞后效应因子表达及对DC趋化?成熟和激发CTL抗瘤免疫活性?移植瘤大小以及荷瘤小鼠生存期等指标,评价重组HSV-1抗瘤效应,以期解决目前DC疫苗在抗肿瘤治疗中的局限性,为肺癌的靶向溶瘤病毒-基因-免疫治疗提供理论和实验依据,探索恶性肿瘤全身生物免疫治疗新思路

成熟树突状细胞具有强大的抗肿瘤活性，本项目基于我们既往观察的局部放射激活 DC 抗肺癌免疫应答效应，以 I 型单纯疱疹病毒 NV1066为基础，构建含共表达 MIP-3α及 TNF-α基因并可全身应用的重组 HSV-1 病毒，靶向感染肿瘤细胞，在肿瘤组织局部高表达 MIP-3α及 TNF-α，趋化、活化未成熟 DCs 至瘤灶局部，激发 CTL 抗瘤免疫应答。实验过程中HSV-1病毒重组未能顺利完成，调整为重组可复制性ADV病毒，目前已完成调整后病毒重组和纯化，经鉴定正确的腺病毒命名为PPE3-T2ACL，即携带TNF-α和MIP-3α基因调控增殖型5型腺病毒，现正在进行体外实验，观察重组病毒感染 LLC 细胞后效应因子表达及对 DC 趋化、成熟和激发 CTL 抗瘤免疫活性。并将尽快进行体内实验，观察移植瘤大小以及荷瘤小鼠生存期等指标。