Netrin-1和Slit-2在胸腺细胞发育中的作用研究

胸腺细胞在微环境的定向迁移对保证其正常的发育至关重要，以往认为趋化因子、细胞外基质等对胸腺细胞迁移和发育起关键作用，现在有越来越多的证据表明趋化排斥分子也可能发挥重要作用。本课题即研究神经轴突导向排斥分子Netrin-1和Slit-2在胸腺细胞迁移和发育中的作用，它们在外周均可抑制白细胞的迁移，但对胸腺细胞迁移和发育的作用国内外尚未见相关研究。我们的前期工作发现，Netrin-1在胸腺基质细胞有较高水平的表达。胚胎胸腺细胞和成年鼠DN细胞表达其相应受体。胸腺基质细胞高表达Slit-2，而受体在胚胎胸腺细胞和胸腺基质细胞均有表达。本研究将在前期工作基础上，详细分析Netrin-1、Slit-2及受体在不同发育时期、不同亚群胸腺细胞的表达模式，通过多种实验手段和体内外实验进一步研究Netrin-1和Slit-2对胸腺细胞迁移、黏附、增殖、凋亡、发育等的影响，揭示胸腺细胞迁移和发育调控的复杂性。

神经轴突导向分子Netrin-1 参与多种生物学功能，但其在淋巴细胞发育中的作用未见报道.本研究发现，Netrin-1在胸腺组织表达，主要由胸腺基质表达，其在胸腺细胞的表达可被anti-CD3 或IL-7刺激而诱导上调。Netrin-1 可介导胸腺细胞的黏附，此功能可以与细胞外基质Fibronectin 相媲美，此外，Netrin-1 可以选择性的促进趋化因子CXCL12 的趋化功能。这些都表明Netrin-1 在淋巴细胞发育过程中发挥重要的作用。对外周免疫系统的研究发现，Netrin-1分子可以增强低剂量CCL19对CD4 T细胞的趋化效应，并且该效应具有剂量依赖效应，Netrin-1 可以促进CD4 T细胞的归巢作用。此外，Netrin-1 可增加anti-CD3&28刺激后CD4 T细胞IL-2的分泌，但是对IFN-γ的分泌有抑制作用，促进Th1 细胞极化。总的来说，Netrin-1 在淋巴细胞多个生理功能方面发挥重要的生理功能。Slit 2 及其受体Robo1 也在胸腺表达，Slit 2 可抑制胚胎14.5天胸腺细胞对趋化因子CXCL12 的趋化作用。通过Slit 2 基因缺陷小鼠分析，胸腺细胞发育没有明显的变化，而炎症的研究提示Slit 2 具有一定的炎症保护作用。