CHP2/HCA520相互作用蛋白的筛选及肿瘤生物学机制研究

CHP2/HCA520是本室利用SEREX方法从人肝细胞癌cDNA表达文库中筛选到的肝细胞癌相关抗原，前期工作证实，其过表达可促进细胞增殖，机制研究发现其能与钙调神经磷酸酶A亚单位结合（CnA），并且促进CnA磷酸酶活性，且能够促进NFAT核转位和增强其转录活性。为了进一步深入探讨CHP2/HCA520在肿瘤发生发展中的作用，利用酵母双杂交技术从293 cDNA 文库中筛选到多个候选蛋白，前期经免疫共沉淀试验验证且具有明确功能提示的相关蛋白有MAGE-D1，Hsulf-2和Striatin。有研究表明MAGE-D1和Hsulf-2具有肿瘤抑制功能，而Striatin为钙调素结合蛋白可能在钙信号中发挥作用。本研究将着重探讨CHP2与这些相互作用分子之间的作用特性，生物学作用的功能影响及在肿瘤发生中的可能意义，为发现可能的肿瘤治疗的干预新靶点奠定基础。

CHP2/HCA520是本室利用SEREX方法从人肝细胞癌cDNA表达文库中筛选到的肝细胞癌相关抗原，其过表达可促进细胞增殖和肿瘤形成，为了进一步深入探讨CHP2/HCA520在肿瘤发生发展中的作用，我们利用酵母双杂交技术从293 cDNA 文库中筛选到多个CHP2相互作用的候选蛋白，经免疫共沉淀试验验证，其与MAGE-D1，Hsulf-2和Striatin等相互作用。进一步结构分析这种相互作用主要有MAGE-D1的MHD 功能域所介导。CHP2能够抑制MAGE-D1的泛素化，主要是抑制MAGE-D1的K48位泛素化，这种泛素化并不影响MAGE-D1的蛋白稳定性。CHP2与MAGE-D1相互作用后，二者在细胞内共定位，且CHP2与MAGE-D1相互作用后能够影响CHP2的细胞内定位。功能研究发现CHP2与MAGE-D1均能够激活NFAT 信号通路。