“补、清、消 肾络”法通过ERK和TGF-β1/Smads信号转导通路调控IgA肾病的机制研究

Under the guidance of the“Collaterals Disease” theory, QiJiShenKang, a patent prescription drug, has been used clinically more than 20 years in our university- affiliated hospital. But until now, the mechanism of its function is still unclear. Based on the preliminary study in vitro, we hypothesized that IgA nephropathy pathogenesis may be a closely related with TGF-β1/Smads and the ERK signal transduction pathway. The traditional Chinese medicine(TCM) compounds prescription, could be nourish kidney collaterals, clear kidney collaterals and dispell kidney collaterals, play a therapeutic role by regulating TGF -β1/Smads and the ERK signal transduction pathway. Aim of this study is to identify the pathogenesis of IgA nephropathy and the therapeutic role of QiJiShenKang. Using CS57BL/6J genetically modified mice, were treated with QiJiShenKang prescription, to study the change of the targets FN, Col - IV of IgA nephropathy. And at the same time, to study the mRNA and protein expression levels of NF-κB, ERK, Smads , IL-6, MCP- 1, TNF-α, TGF-β1.This research will reveal the scientific significance of kidney collaterals disease, and develop new TCM therapy pathways.

在中医学“络病”理论指导下的专利处方芪蓟肾康汤是临床应用20余年的院内制剂——消斑愈肾颗粒优化后处方，其作用机制尚不清楚。在前期体外研究基础上，提出科学假说： IgA肾病发病机制可能与 TGF-β1/Smads和ERK信号转导密切相关；运用“补肾络、清肾络、消肾络”中药复方可能通过调控以上两条通路，而发挥治疗作用。研究以CS57BL/6J转基因小鼠为研究对象，以芪蓟肾康汤为研究因素，通过体内实验干预NF-kB、ERK、Smads和效应因子IL-6、MCP-1、TNF-α、TGF-β1蛋白、基因水平的表达，观察IgA肾病的作用靶点FN、Col-IV，阐明IgA肾病的发病机制及芪蓟肾康汤的疗效作用。研究将揭示“肾络病“理论的科学内涵，为中医药学拓展新的治疗途径。

基于中医学“肾络病”理论指导下的专利处方芪蓟肾康汤，临床应用20余年，其作用机制尚不清楚。在前期体外研究基础上，提出科学假说：IgA 肾病发病机制可能与TGF-β1/Smads和ERK信号转导密切相关；运用“补肾络、清肾络、消肾络”中药复方可能通过调控以上两条通路，而发挥治疗作用。体内实验部分，通过IgAN的发病机制主要是血清中IgA1铰链区糖基化的异常情况，利用转基因方法将人IgA1铰链区上的O-糖基化位点进行特异性的突变，将该突变后的IgA1分子序列转入小鼠体内，置换小鼠原有的铰链区序列，构建并评价含有人IgAN转基因新型小鼠模型，建立一种更加稳定的动物模型进行体内实验，以芪蓟肾康汤为硏究因素，通过体内实验干预NF-kB、ERK、 Smads和效应因子IL-6 、MCP-1、TNF-a、TGF-β1蛋白、基因水平的表达，观察IgA肾病的作用靶点及芪蓟肾康汤的实验疗效；体外实验部分，创新性针对IgAN发病靶器官——人肾小球系膜细胞进行体外实验培养，以芪蓟肾康汤为硏究因素，从细胞水平观察ERK信号通路及相关细胞因子MCP-1、NF-kB 、IL-6、 TNF-a、TGF-β1 、 Smads表达变化情况，最终结果阐明了IgA肾病的发病机制与TGF-1/Smads和ERK信号转导密切相关，证明了“补、清、消肾络”指导理论芪蓟肾康汤可能通过多靶点调节TGF-β1/Smads 和ERK信号转导通路，实验疗效确切。揭示了“肾络病“理论的科学内涵，为中医药学拓展新的治疗途径。