消癥散结、扶正活络方药对肾纤维化TGF-β1/ Smads信号通路的调控机制研究

原发性或继发性慢性肾病导致肾纤维化的病理基础是肾细胞外基质异常增多，多属于中医 "久病入络"范畴，与中医肾络微型癥瘕理论相切合。中医药在防治肾病方面有悠久的历史，尤其在抗肾纤维化方面显示了独特的优势。本研究结合中医络病理论和癥瘕病机学说，在消癥散结、扶正活络方药临床有效性的基础上，采用在体动物实验（单侧输尿管结扎肾间质纤维化动物模型、5/6肾切除肾小球硬化动物模型）、离体细胞实验（肾小管上皮细胞）等手段，观察消癥散结、扶正活络方药调控肾纤维化TGF-β1/ Smads信号通路的作用，探讨其肾保护作用及抗肾纤维化的作用位点。本课题从"肾络微型癥瘕与信号通路结合"的创新理论探求中医药防治肾纤维化的特征性规律, 以获得更为科学详实的实验资料，为进一步阐释消癥散结、扶正活络方药抗肾纤维化的现代生物学机制奠定基础，对丰富中医理论的现代研究有重要意义。

本项目按原计划执行，并参阅文献了解了国内外抗肾纤维化方法的最新研究动态，根据实验中新的发现和目前新技术的发展，扩充了相应的研究内容，结合中医络病理论和癥瘕病机学说，在消癥散结、扶正活络方药临床有效性的基础上，本项目采用在体动物实验、离体细胞实验等手段，观察了消癥散结、扶正活络方药调控肾纤维化TGF-β1/ Smads信号通路的作用，研究了消癥散结、扶正活络方药对大鼠肾纤维化的拮抗作用及其作用靶点。结果显示该方药可延缓模型大鼠肾纤维化进程。采用TGF－β1诱导肾小球系膜细胞增殖和Ⅳ型胶原表达作为肾纤维化的细胞模型实验中，检测了肾小球系膜细胞的增殖抑制率及肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原的表达。结果显示与空白对照组比较, TGF－β1处理组细胞经TGF－β1诱导后HMCs增殖明显，细胞内ECM物质Ⅳ型胶原含量显著提高，差异均具有统计学意义。与TGF－β1处理组比较, 消癥散结、扶正活络方药组可抑制TGF－β1诱导的HMCs的增殖及Ⅳ型胶原的表达，差异均具有统计学意义。本项目探讨了其肾保护作用及抗肾纤维化的作用位点。从"肾络微型癥瘕与信号通路结合"的创新理论探求中医药防治肾纤维化的特征性规律, 获得了更为科学详实的实验资料，为进一步阐释消癥散结、扶正活络方药抗肾纤维化的现代生物学机制奠定了基础，对丰富中医理论的现代研究有重要意义。通过本课题的研究，阐释了消癥散结、扶正活络方药抗肾纤维化的现代生物学机制，为研究中药复方在细胞内信号传递通路及信号转导中的调控作用确定了靶点。