热纤维梭菌β-葡聚糖酶耐热的分子机理研究

在证明了热纤维梭菌β-葡聚糖酶较高的热稳定性主要与其催化结构域相关和确定影响其热稳定性的N末端和C末端区域基础上，将影响热纤维梭菌β-葡聚糖酶催化结构域的N末端和C末端区域替代相应芽孢杆菌酶的N末端和C末端，以验证热纤维梭菌葡聚糖酶催化结构域的N末端和C末端是否影响其热稳定性。再根据实验结果及热纤维梭菌葡聚糖酶催化结构域三维结构模型分析结果，对其N末端、C末端及中间区域内具有相互作用的非同源关键氨基酸进行点突变(单点和/或多点突变)，并进行表达、纯化和酶特性研究。通过系统研究，进一步探明热纤维梭菌β-葡聚糖酶耐热的分子机理。本项目的研究结果将完善热纤维梭菌β-葡聚糖酶热稳定性的分子结构知识，并为蛋白质工程改造β-葡聚糖酶及其他工业用酶的热稳定性提供理论依据和方法借鉴，对蛋白质结构与功能关系的研究具有重要的科学意义和应用价值。