TNFα增强大肠杆菌穿透肠粘膜上皮细胞屏障的机制研究

我们研究发现在急性肝坏死动物中大肠杆菌穿入肠粘膜上皮细胞内区域细胞间紧密连接断裂，TNFα抑制肠粘膜上皮细胞内ZO-1蛋白和mRNA表达造成紧密连接断裂。在此基础上应用体外肠粘膜屏障模型，观察TNFα增强大肠杆菌穿透其屏障和应用TNF受体抗体封闭肠粘膜上皮细胞膜上受体观察其抑制TNFα促进大肠杆菌穿透肠屏障作用；通过干扰肠粘膜上皮细胞TNF受体基因观察其阻断TNFα促进大肠杆菌穿透肠屏障作用；说明TNFα是引起大肠杆菌穿透肠屏障重要因子。应用已干扰ZO-1基因的肠粘膜上皮细胞建立肠屏障模型观察大肠杆菌穿透性，证明ZO-1表达减少使肠粘膜上皮细胞屏障破坏与大肠杆菌穿透肠屏障密切相关。通过寻找TNFα作用于ZO-1启动子抑制ZO-1表达的结合蛋白和确定ZO-1基因上与结合蛋白相结合的位点，阐明TNFα使ZO-1表达降低的机制。研究对阐明急性肝坏死易并发腹膜炎，揭示细菌穿透肠屏障机制有重要意义。