RIP140及其相关基因在胰岛β细胞中的作用及调控机制研究

受体相互作用蛋白140（RIP140）是联结代谢和炎症通路的重要分子，其表达量的变化可能影响胰岛素作用的敏感性和胰岛β细胞的代谢生长，但具体机制研究甚少，尤其是后者尚未见报道。本项目在前期研究炎症与糖尿病关系的基础上，用真核表达载体构建、细胞转染以及细胞克隆筛选等技术获得RIP140表达稳定上调或下调的MIN-6细胞株，研究其表达变化对高浓度脂肪酸条件下MIN-6细胞的生长凋亡、局部炎症、氧化应激、功能及其相关基因表达等方面的作用；用荧光酶素检测系统等方法分析RIP140与代谢性核受体在胰岛素分泌方面的协同关系；构建靶向RIP140的慢病毒microRNA表达载体，通过感染C57小鼠建立上调或下调RIP140表达的小鼠模型，进一步观察高脂饮食条件下RIP140对胰岛β细胞及肥胖诱导的胰岛素抵抗的不同影响，以揭示RIP140在糖尿病中的具体作用机制，为糖尿病的针对性治疗提供新靶点和依据。

代谢性核受体辅助因子受体相互作用蛋白140（RIP140）目前研究主要集中在肝脏、脂肪、肌肉及巨噬细胞等组织中，但是缺乏胰腺组织尤其是胰岛β细胞的研究。本项目主要开展了RIP140在胰岛β细胞中的调控机制研究，前期结果显示在糖尿病条件下胰岛β细胞RIP140表达上调，进一步通过体内体外上调或下调RIP140表达结果显示RIP140的上调增加高糖高脂对胰岛β细胞损伤以及促进糖脂代谢紊乱、胰岛素抵抗，主要通过影响生长凋亡、局部炎症、氧化应激、功能及其相关基因表达，下调RIP140表达则能改善相关作用，同时RIP140能够负向调控代谢性核受体PPAR γ对胰岛素分泌的作用，为糖尿病的针对性治疗提供了新靶点和依据。另外拓展研究发现RIP140还参与糖脂对血管内皮细胞功能的影响以及代谢性孤儿核受体Nurr1、Nurr77及NR2E1参与糖尿病外周慢性低度炎症的发生，进一步明确代谢性核受体在糖尿病发病中的机制。