EP400在调控膀胱癌转移中的功能和分子机制研究

Bladder cancer (BC) is one of the most common forms of malignancies in the urinary system and metastasis is the leading cause of death in BC patients. Our previous studies showed that EP400 gene deletions significantly increased the occurrence of metastatic BC. We found that down regulation of EP400 expression in vitro can significantly promote cell migration while over-expression of EP400 can significantly inhibit the migration of bladder cancer cells. The molecular mechanisms by which EP400 inhibits BC metastasis are still unclear. In the proposed study, the effects of EP400 deregulation on the epithelial mesenchymal transition (EMT), invasion and migration of bladder cancer cells will be measured after transfection with plasmid or siRNA. Furthermore, the roles of Wnt/β-catenin and NF-κB pathways in mediating the tumor-suppressing effects of EP400 will be investigated using different methods. Subcutaneous xenotransplanted tumor model of human bladder cancer cell line in nude mice will be used to validate the tumor-suppressing roles of EP400 in vivo. The completion of this study will provide a novel mechanistic insight into the mechanisms by which EP400 suppresses invasiveness and metastasis potential of bladder cancer cells and will also provide theoretical basis for the prognosis of bladder cancer as well as the development of anti-metastasis therapies.

膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一，转移是膀胱癌患者致死的主要原因。2015申请人首次通过大规模临床样本组学研究，鉴定出EP400基因缺失与膀胱癌转移呈显著相关性，在膀胱癌细胞内沉默EP400基因后能显著促进细胞迁移，过表达EP400能显著抑制迁移。但该基因在调控膀胱癌转移中的作用和分子机制研究尚不清楚。本研究拟在膀胱癌细胞系内沉默和过表达EP400基因，检测对肿瘤细胞上皮间质转化、转移的影响，然后检测细胞内Wnt/β-catenin和/或NF-κB调控通路中关键信号分子变化，并用荷瘤裸鼠进行验证，最终确定EP400调控膀胱转移的分子信号通路，阐明EP400基因低表达与膀胱癌转移的关系及分子调控机制，从而系统探讨EP400 执行生物学功能的分子机理，为膀胱癌预后诊断及抗肿瘤药物的设计提供理论依据。

膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤之一，转移是膀胱癌患者致死的主要原因。申请人前期通过临床样本组学研究，鉴定出膀胱癌转移相关基因EP400，并通过体外实验证明EP400抑制膀胱癌细胞迁移，随后的研究证实该基因可能还参与膀胱癌细胞对于顺铂的耐受作用。基于EP400在膀胱癌转移中的作用及其在表观遗传修饰和膀胱癌耐药中的功能，我们主要从三个方向深入展开了本项目：1）探究与EP400同样具有表观调控功能的YTHDF2，研究其在膀胱癌发生发展中的作用和机制；2）基于EP400调控膀胱癌耐药的功能预测，在三维培养模型中探究膀胱癌发展机制，探索新型化疗方式对膀胱癌耐药的影响；3）基于膀胱癌临床新疗法的开发，探究新光亲和性分子探针在膀胱癌光动力治疗中的应用。我们发现YTHDF2通过识别发生m6A修饰的DDX58，促进其降解，从而抑制I型干扰素和细胞凋亡促进膀胱癌的发生;在膀胱癌细胞三维培养模型中证实，lncRNA HECTD2-AS1通过调控LCN2通路促进膀胱癌转移,制备产氢纳米粒[FeFe] TPP / GEM / FCS NPs，并在体外和体内实验中，证实该产氢纳米粒联合化疗药物在抑制肿瘤方面有更好效果;研究实验证明，经过改造的新光亲和性分子探针，体外显著抑制膀胱癌细胞的生长，促进其凋亡，体内明显抑制肿瘤的生长，显示了该探针较好的治疗前景。综上所述，本项目完善了膀胱癌发生和转移的分子机制，探索了新型纳米颗粒和分子探针在膀胱癌治疗中的效果，对膀胱癌的临床治疗具有一定的指导和借鉴意义。