针灸对PTEN甲基化介导的CAG相关性癌前病变PI3K/Akt通路的调控机制研究

As Chronic Atrophic Gastritis（CAG）has the neoplastic potential of Gastric cancer,so blocking and reversing its’ progression are effective measures to reduce the incidence of Gastric cancer.There are two goals of our research program.First,investigate the regulatory mechanism of PTEN promoter methylation to the abnormal expression of PI3K、Akt、mTOR,which are located in Gastric mucosa.In order to do this ,we want to take “High PTEN promoter methylation is a key link in the process of precancerous lesions” as the breakthrough point，regard the PTEN promoter methylation modification abnormalities and the negative regulation of PI3K/Akt/mTOR signaling pathways as the departure angles,combine histomorphology, modern molecular biology and RRBS high-throughput sequencing technologies with Bioinformatics analysis technologies.Second ,based on the clinical and basic results, we are going to prove that moxibustion can reduce the level of PTEN promoter methylation,and regulate the signaling pathways , of PI3K/Akt/mTOR,then control the Gastric mucosa damage effectively and eventually achieve the purpose of preventing and controlling CAG precancerous lesions..Based on these two goals ,we intend to supply scientific experimental basis for the extensive applications of acupuncture and moxibustion to CAG .

慢性萎缩性胃炎（CAG）有癌变倾向，阻断或逆转其发展是降低胃癌发生率的有效措施。本项目拟从PTEN启动子高甲基化是发生癌前病变的关键环节之一为切入点，应用组织形态学、现代分子生物学和限制性酶切甲基化测序（RRBS）高通量测序技术结合生物信息学分析，旨从PTEN启动子甲基化修饰异常、PI3K/Akt/mTOR信号通路的负性调控角度，探讨PTEN启动子高甲基化对CAG胃黏膜的PI3K、Akt、mTOR表达异常的调控机制。 拟从动物实验和临床试验方面，证实艾灸可能是通过降低PTEN启动子甲基化水平，参与调控胃黏膜组织的PI3K/Akt/mTOR信号通路，有效控制CAG的胃黏膜损伤，达到防治CAG癌前病变的目的，以期为针灸防治CAG癌前病变研究提供科学的实验依据。

慢性萎缩性胃炎（CAG）有癌变倾向，阻断或逆转其发展是降低胃癌发生率的有效措施。项目基于动物实验和临床试验从PTEN启动子甲基化修饰异常、PI3K/Akt/mTOR信号通路的负性调控角度，探讨PTEN启动子高甲基化对CAG胃黏膜的PI3K、Akt、mTOR表达异常的调控机制。研究发现并证实：（1）隔物灸可有效改善CAG患者临床症状，治疗前后中医症状积分比较差异有统计学意义（P＜0.05），治疗后胃黏膜的炎症、萎缩、肠化病变程度有明显改善（P＜0.05）。（2）用MNNG结合夹尾刺激与饥饱失常法可提供良好CAG大鼠模型，诱发大鼠经历萎缩性胃炎、异型增生、胃癌。本组大鼠胃癌均发生于幽门胃窦部小弯侧，多呈隆起结节型或溃疡型；胃癌组织学类型有乳头状腺癌，分化型、未分化型管状腺癌；癌肿浸至胃壁各层组织，这些都与人类胃癌发生相似。（3）非萎缩胃炎和萎缩性胃炎大鼠胃窦黏膜比较显示PTEN、PI3K、p-mTOR、PIP2、MDM2蛋白表达皆有显著差异，提示CAG可能因炎症环境下粘膜细胞PTEN功能失活，对PI3K/Akt/mTOR通路失抑制，从而造成慢性非可控炎症，局部传递抗凋亡信号，遗传不稳定，促使癌细胞生长。在轻度萎缩胃炎至胃癌进展的病理分组中可见，PI3K、PIP2、MDM2蛋白皆有级联趋势，示意随着病理程度加深，病灶恶性程度加重。（4）CAG的病理发展过程中伴多种基因DNA甲基化水平发生改变，且DNA甲基化异常主要集中在CpG岛区域，但胃癌组织与癌前病变组织的DNA甲基化谱差异较小。（5） 针灸能上调CAG大鼠胃窦组织抑癌基因PTEN蛋白表达水平，调控CAG大鼠胃窦组织PTEN/PI3K/Akt信号通路，进而有效控制CAG的胃黏膜损伤，是针灸治疗CAG和防治癌前病变的效应机制之一。（6）针灸可能通过调节CAG相关基因DNA甲基化水平，调控MAPK、PI3K-Akt、T细胞受体、Th17细胞分化等免疫相关信号通路，起到改善和缓解黏膜炎症的作用。（7）文献研究：长期反复发作的慢性萎缩性胃炎可增加肿瘤的易感性，有发展为胃癌的风险，研究参与撰写综述，探讨胃癌相关的Cofilin分子的功能和作用，可作为部分肿瘤治疗的靶点。. 项目发表学术论文8篇，其中 SCI 发表/录用各1篇。实用新型专利2项，专著1部，部分相关成果获科技成果进步一等奖2项。培养博/硕生各2人。