非小细胞肺癌原发灶及配对血、转移灶、靶向药物干预后EML4-ALK融合基因的研究

This paper focus on the field of lung cancer research is known as the EML4 ALK lung cancer driver genes is a small probability event is studied. 1. For non-small cell lung cancer ( NSCLC ) were detected in peripheral blood of patients with EML4-ALK gene, lung tumor tissue, metastatic lymph nodes and hydrothorax mutation status, to explore the expression of EML4-ALK gene mutation rate. 2. Prove the consistency of peripheral blood, lung tumor, lymph node metastasis, EML4-ALK gene mutation in the water. 3. On the basis of this, analysis of the relationship between the EML4-ALK antagonist - gram of imatinib therapy between NSCLC patients peripheral blood, lung tumor tissues, metastatic lymph nodes and chest fluid EML4-ALK gene mutation and clinical characteristics, clinical disease control rate, curative effect monitoring. 4. Research on real-time fluorescence quantitative PCR ( FQ-PCR ) feasibility of clinical application of technology for NSCLC molecular targeted therapy of non-invasive, individualized, dynamic prediction. To reveal the dynamic changes of EML4-ALK gene mutation treatment application value in the field of drug molecular target in NSCLC.

本课题围绕肺癌领域研究的热点即新近发现的EML4－ALK肺癌驱动基因这一小概率大意义的事件进行较系统的研究。 1、对非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血、肺肿瘤组织、转移淋巴结和胸水的EML4-ALK基因突变状态进行配对检测,探讨EML4-ALK基因突变的表达率。 2、探明外周血、肺肿瘤组织、转移淋巴结、胸水中EML4-ALK基因突变的一致性。 3、在此基础上，分析EML4-ALK拮抗剂－克唑替尼治疗后的NSCLC患者外周血、肺肿瘤组织、转移淋巴结和胸水中EML4-ALK基因突变及与临床特征、临床疾病控制率、疗效监测等之间的关系。 4、研究临床应用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）技术进行NSCLC分子靶向治疗无创性、个体化、动态化预测的可行性。揭示EML4-ALK基因突变的动态变化在NSCLC分子靶向药物治疗领域中的应用价值。

本研究采用实时荧光PCR法（FQ-PCR） 技术检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者肺组织、血液及胸水中肺癌最新治疗靶点EML4-ALK 融合基因的表达情况，进一步探讨了部分同步检测肺癌组织、外周血、胸水中EML4-ALK基因表达率；明确了不同组织EML4-ALK基因表达的一致性, 从而初步明确NSCLC患者在难以取得肺癌组织的情况下，应用FQ-PCR法检测血液及胸水等转移灶中EML4-ALK基因突变可应用于临床筛选患者。.本研究按标本收集来源和完成时间顺序分四部分完成：1、检测123例肺癌患者血清和98例肺癌组织，123例肺癌患者血清EMI4-ALK融合基因阳性突变为10．6％（13/123)，98例肺癌组织中EML4-ALK融合基因阳性突变为11．2％（11/98)。77例肺癌组织与血清配对检测EML4-ALK融合基因突变一致性为66．7％(6／9，K=0．779)。2、检测119例肺癌患者肺组织和71例转移灶组织，119例肺癌患者肺组织EMI4-ALK融合基因阳性突变为8.4％（10/119),71例转移灶组织中EML4-ALK融合基因阳性突变为7.1％（5/71)。15例肺癌组织与转移灶配对检测，转移灶与肺癌组织突变一致性达到100％（2/2)。3、检测91例肺癌患者胸水和79例肺癌组织，91例肺癌患者胸水EMI4-ALK融合基因阳性突变为12.8％（11/91)，79例肺癌组织中EML4-ALK融合基因阳性突变为11．39％（9/79)。21例肺癌组织与胸水配对检测，胸水与肺组织EML4-ALK 融合基因阳性突变一致性达到66．7％（2/3)。4、检测215例胸水和404例肺癌组织。215例肺癌患者胸水EML4-ALK融合基因阳性突变为12.09%(26/215),404例肺癌组织EML4-ALK融合基因阳性突变为6.19%(25/404),其中有74例为肺癌组织配对胸水，ALK融合基因一致性达90.54%(67/74)。