基于BCL10的活化型弥漫性大B细胞淋巴瘤靶向治疗的研究

Activated B cell-like diffuse large B cell lymphoma (ABC-DLBCL) is the most chemotherapy resistant and clinical challenging subtype of DLBCL. Currently there is no effective therapy for ABC-DLBCL. Studies have shown that the CARMA1-BCL10-MALT1 complex (the CBM complex) plays a key role in mediating NF-KB activation and promoting aberrant cell proliferation and growth in ABC-DLBCL. Previously, we have unraveled that upon signal stimulation, the CBM complex assembles into a helical filamentous structure, which provides a central scaffold for the recruitment, aggregation and activation of downstream signaling components that result in NF-κB activation. BCL10 polymerizes and forms the core of the filament. The polymerization function of BCL10 is critical for the function of the CBM complex and could serve as potential therapeutic target to modulate the function of CBM complex and NF-κB signaling. Therefore, we hypothesize that inhibition of BCL10 polymerization is an effective method for the treatment of ABC-DLBCL. In this project, we plan to identify BCL10 inhibitors that could block the polymerization function of BCL10 through high throughput screening, evaluate their impact on NF-κB activity and the growth of ABC-DLBCL cells, explore their efficacy in inhibiting the growth of ABC-DLBCL tumors in xenotransplanted mouse model, and elucidate their mechanisms of action. This project will elucidate that inhibiting the polymerization function of BCL10 is an effective method to treat ABC-DLBCL, and provide new therapeutic directions for the treatment of ABC-DLBCL.

活化型弥漫性大B细胞淋巴瘤（ABC-DLBCL）对传统的化疗药物有强烈的耐药性，目前尚无有效治疗方法。研究发现CARMA1-BCL10-MALT1 （CBM）复合体在介导NF-κB活化、促进ABC-DLBCL生长中有关键作用。前期我们发现CBM活化后组装成蛋白纤维，为NF-κB活化提供了中心支架平台，其中BCL10是CBM蛋白纤维结构的核心，其聚合能力是实现CBM功能的关键。据此，我们提出假说：BCL10是治疗ABC-DLBCL的有效靶点。本项目将在前期研究基础上通过高通量筛选针对BCL10聚合能力的小分子抑制剂，在细胞水平上研究此抑制剂对NF-κB信号通路和ABC-DLBCL细胞生长的影响，并在小鼠异体移植模型体内检验其对ABC-DLBC肿瘤生长的作用，阐明其作用机制。该研究将揭示对BCL10聚合能力的抑制是治疗ABC-DLBCL的有效策略，并为ABC-DLBCL提供新颖有效的治疗方法。

活化型弥漫性大B细胞淋巴瘤（ABC-DLBCL）对传统的化疗药物有强烈的耐药性，目前尚无有效的治疗方法。研究发现由CARMA1、Bcl10和MALT1三个蛋白组成的CBM 复合体为NF-KB活化提供了中心的蛋白支架从而促进NF-KB下游蛋白的招募和活化。CBM复合体的功能紊乱在促进NF-KB活化、促进ABC-DLBCL生长中有关键作用。CBM复合体的功能依赖于Bcl10的聚合并形成纤维结构的能力。因此，我们根据Bcl10的结构设计了一系列的小分子肽抑制剂。我们测试了小分子肽抑制剂在细胞内的作用，发现其中两个小分子肽（Bcl10-P2 和Bcl10-P4），能选择性地抑制ABC-DLBCL细胞的生长，而对GCB-DLBCL细胞的生长没有作用。进一步研究发现，这两个小分子肽能通过和Bcl10相互作用，抑制Bcl10 的聚集和纤维结构形成，并促进Bcl10的降解，抑制Bcl10和MALT1的活性及其下游NF-KB信号通路的活性，从而抑制依赖于Bcl10信号通路的ABC-DLBCL细胞的生长。将Bcl10-P2 和Bcl10-P4转化成结构不变的D型氨基酸的反向序列（DRI）保存了Bcl10-P2 和Bcl10-P4的活性，并提高了Bcl10-P2 和Bcl10-P4的稳定性、延长了Bcl10-P2 和Bcl10-P4的半衰期。在小鼠模型中，我们发现DRI-Bcl10-P4能选择性地抑制ABC-DLBCL肿瘤在小鼠体内的生长，而没有表现出明显的毒副作用。机制研究发现，DRI-Bcl10-P4能通过抑制增殖和诱导凋亡来抑制ABC-DLBCL细胞的生长。因此，我们的研究证明了Bcl10是治疗ABC-DLBCL的有效靶点，并提供了一种新型的治疗ABC-DLBCL及其他依赖于Bcl10介导的NF-KB信号通路疾病的Bcl10小分子肽抑制剂。